[发明专利]一种从川蔓藻中提取对抗微藻化感物质的方法及应用

摘要

本发明公开了一种从川蔓藻中提取对抗微藻化感物质的方法。采用石油醚做溶剂从川蔓藻中提取化感物质，浸提时石油醚和川蔓藻按照1：10(m:v)比例在15‑30℃条件下浸提三次，浸抽提后有机相混合，减压浓缩挥发机溶剂，得到川蔓藻化感物质，稀释后进行抑藻应用。实验结果显示川蔓藻石油醚提取的化感物质对铜绿微囊藻具有高效抑制作用，化感物质添加量在90‑200mg/L，对铜绿微囊藻抑藻率为50‑95%，七天半抑制率浓度为92mg/L。且30天后化感物质可自然降解，不会对水环境造成二次污染。本发明具有提取方法简单，生态安全性高等特点，为水环境保护领域应用化感物质抑制蓝藻水华的方法提供了科学依据。

主权项

1.一种从川蔓藻中提取对抗微藻化感物质的方法，其特征在于按如下的步骤进行：(1)川蔓藻在40‑60℃干燥48h，人工或机械破碎至过40目筛，加入石油醚，其中川蔓藻：石油醚的重量体积比为1:10，静置提取24h，重复3次，合并提取液，先用滤纸过滤，再用0.22µm的玻璃纤维滤膜过滤，滤液用旋转蒸发仪在条件45℃，100r/min下，减压蒸发呈浸膏状，得到川蔓藻化感物质，浸膏再溶于二甲基亚砜有机溶液中，其中浸膏：二甲基亚砜的重量体积比为1g：5mL，配置成固定浓度，为化感物质母液；(2)将化感物质母液投加于含铜绿微囊藻的培养基中，投加化感物质最终浓度为90‑200mg/L，藻密度范围1×10⁵‑1×10⁶cell/mL；所述的铜绿微囊藻的培养基指的是BG11培养基；(3)用柱层析进行梯度洗脱，洗脱液的体积比为石油醚：乙酸乙酯（10：1，9：1，7：1，5：1，3：1，1：1，0：1），洗脱物每50ml收集一份，通过TCL进行合并组份，得到组份A(1‑11)，B(12‑23)，C(24‑33)，D(34‑46)，E(47‑61)；(4)五个组分分别进行抑藻实验，浓度为100mg/L，培养时间为7天，抑藻情况；(5)A，C组份抑藻活性最高，对A，C组份和石油醚提取物(P)用GC‑MS进行鉴定。