[发明专利]一种介导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的方法在审
申请号: | 201910640786.6 | 申请日: | 2019-07-16 |
公开(公告)号: | CN110358725A | 公开(公告)日: | 2019-10-22 |
发明(设计)人: | 唐柏林;沈小军;董灵庆 | 申请(专利权)人: | 嘉兴学院 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 万尾甜;韩介梅 |
地址: | 314033 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种介导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的方法。该方法在常规培养细胞过程的基础上,简单地将细胞培养容器以逆时针进行旋转,置于细胞培养孵箱中进行培养,培养21天可获得成骨细胞,尤其是以每分钟12‑16转进行逆时针旋转时,获得细胞的碱性磷酸酶ALP表达显著上调。本发明提供的旋转培养法介导间充质干细胞定向向成骨细胞分化的方法不仅容易操作,在不添加任何诱导因子的条件下,可显著提高骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向的分化。 | ||
搜索关键词: | 骨髓间充质干细胞 成骨细胞分化 介导 成骨细胞 碱性磷酸酶ALP 间充质干细胞 细胞培养孵箱 细胞培养容器 逆时针旋转 常规培养 细胞过程 旋转培养 诱导因子 分化 细胞 | ||
【主权项】:
1.一种介导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)将骨髓间充质干细胞以5×104/cm2的密度均匀种在细胞培养容器中,并加入含10%体积分数胎牛血清的DMEM培养基,置于细胞培养孵箱中培养24h,使细胞充分黏附;2)将步骤1)的细胞培养容器放入细胞培养孵箱中培养,培养过程中使细胞培养容器以逆时针方向旋转,且旋转方向保持在水平面上,每隔2~3天换液一次;3)按照步骤2)继续培养骨髓间充质干细胞,经21天可获得成骨细胞;所述的细胞培养孵箱的设定条件为37℃,5%CO2浓度。
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