[发明专利]一种红豆草花药愈伤组织的诱导方法及其专用培养基

摘要

本发明提供了一种红豆草花药愈伤组织的诱导方法及其专用培养基，属于牧草生物技术领域。本发明的方法是首先将筛选出的红豆草花序进行低温和离心预处理，有利于促进花药愈伤组织的形成；然后剥取花药接种于本发明的愈伤组织诱导培养基上培养得到愈伤组织。本发明的愈伤组织诱导培养基是在基本培养基的基础上进行的优化，适当提高了KNO₃、KH₂PO₄、维生素、蔗糖等浓度，调整了常规植物激素配比，并添加了L‑脯氨酸、γ‑氨基丁酸、环磷酸鸟苷、油菜素内酯、N‑甲基吗啉、黄腐酸、丁基羟基茴香醚、二硫苏糖醇以及紫云英提取液，可有效地提高红豆草花药愈伤组织的诱导率，进而提高红豆草花药培养效率。

主权项

1.一种红豆草花药愈伤组织的诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：1）花序采集：在红豆草的初花期，于晴天、无露水时采集红豆草花序，然后筛选出花粉发育时期处于单核中晚期的花序作为试验材料；2）花序预处理与消毒：将花序用自来水冲洗干净后放入铺有湿润滤纸的培养皿中，置于4℃低温处理48h，期间每天喷水1次，保持花序及滤纸始终湿润；然后将花序以2500r/min的转速离心处理6‑10min；将预处理后的花序置于无菌操作台中进行表面消毒；3）愈伤组织诱导培养：在无菌条件下用解剖针从上述花序中剥取花药，接种于装有愈伤组织诱导培养基的三角瓶中，每瓶接种40‑50枚花药，透气膜封口，将三角瓶先置于20‑24℃黑暗条件下培养7d，再转入光照条件下继续培养14‑21d获得花药愈伤组织。