[发明专利]一种丁酸梭菌高密度发酵及其微生态菌剂的制备方法

摘要

本发明提供了一种丁酸梭菌高密度发酵及其微生态菌剂的制备方法，属于微生物发酵生产领域。本发明通过在菌种种子发酵阶段控制至对数生长后期，并且在发酵初始以及发酵4‑5h、12‑15h过程中，分别控制发酵的罐压、通风量、发酵pH以及发酵温度，有效解决丁酸梭菌菌种活力低，脱芽孢率低等问题，芽孢率可达98％以上，芽孢完全脱落率达到95％以上，且本发明发酵工艺简单，有效减少发酵染菌以及降低发酵原料和时间成本。本发明制备的微生态菌剂，可显著提高菌剂稳定性，菌剂存活率高达97％以上，可实现菌种生产的产业化标准。

主权项

1.一种丁酸梭菌高密度发酵及其微生态菌剂的制备方法，其特征在于：具体步骤如下：(1)种子培养：将丁酸梭菌分别进行一级种子和二级种子培养，在所述二级种子培养中：静置培养至菌种对数生长后期，得到二级种子液；所述二级种子液活菌数为5‑7.6×10⁸cfu/ml；(2)发酵培养：将所述二级种子液按照接种量2‑8％接入发酵培养基中，发酵初始通入氮气，控制罐压0.05‑0.06MPa，风量0.8‑1L/min，转速80‑120rpm，发酵温度37‑38℃，发酵过程中维持pH6.5‑7.2；当发酵至4‑5h，降低罐压至0.03‑0.04MPa，降低通风量至0.5‑0.6L/min；当发酵至12‑15h，调节pH至6.5‑6.8,调整温度至34‑35℃，直至发酵结束，得到发酵液，总发酵时间为24‑28小时；(3)制备菌剂：向所述发酵液中加入保护剂，混合，进行喷雾干燥，得到丁酸梭菌菌剂。