[发明专利]SVA、O型FMDV和A型FMDV的一步法三重实时荧光定量PCR检测引物和探针

摘要

本发明提供了能同时检测鉴别塞内卡病毒、O型口蹄疫病毒和A型口蹄疫病毒的一步法三重实时荧光定量PCR检测引物和探针，属于生物检测技术领域。其中基于提供的引物和探针开发了试剂盒用于对塞内卡病毒、O型口蹄疫病毒和A型口蹄疫病毒进行同时快速检测。本发明的试剂盒和检测方法可实现一次上样、一次分析定量，达到同时快速检测鉴别和准确定量塞内卡病毒、O型口蹄疫病毒和A型口蹄疫病毒的目的，不仅减少了检测的工作量和成本，且能在最短的时间内完成检测。本发明将在塞内卡病毒、O型口蹄疫病毒和A型口蹄疫病毒的检测和疫苗生产中发挥重要作用，应用前景广阔。

主权项

1.用于对塞内卡病毒、O型口蹄疫病毒和A型口蹄疫病毒进行三重实时荧光定量PCR检测的引物和Taqman探针，其特征在于，包括：用于检测塞内卡病毒的上游引物(SVA‑F)和下游引物(SVA‑R)，所述上游引物(SVA‑F)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：1所示，下游引物(SVA‑R)的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：2所示；用于对塞内卡病毒进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(SVA‑P)，所述TaqMan探针(SVA‑P)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：3所示；用于检测O型口蹄疫病毒的上游引物(FMDV‑O‑F)和下游引物(FMDV‑O‑R)，所述上游引物(FMDV‑O‑F)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：5所示，下游引物(FMDV‑O‑R)的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：6所示；用于对O型口蹄疫病毒进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(FMDV‑O‑P)，所述TaqMan探针(FMDV‑O‑P)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：7所示；用于检测A型口蹄疫病毒的上游引物(FMDV‑A‑F)和(FMDV‑A‑R)，所述上游引物(FMDV‑A‑F)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：9所示，下游引物(FMDV‑A‑R)的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：10所示；用于对A型口蹄疫病毒进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(FMDV‑A‑P)，所述TaqMan探针(FMDV‑A‑P)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：11所示；所述探针为经过荧光标记的，其5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团；且对三种病毒检测探针所标记的荧光报告基团不相同。