[发明专利]米尔贝霉素的纯化方法

摘要

本发明提供了一种米尔贝霉素的纯化方法，包括以下步骤：将米尔贝霉素湿菌渣干燥成水分含量为4～6％的米尔贝霉素干菌渣；向米尔贝霉素干菌渣添加乙醇进行浸提，然后过滤，得到米尔贝霉素浸提乙醇液；用正己烷、正庚烷或正辛烷中的任意一种溶剂与水对米尔贝霉素浸提乙醇液进行萃取得萃取液，并将萃取液进行浓缩，制得待上柱液；将待上柱液用柱层析法进行分离纯化，以100～200目柱层析硅胶为固定相，以丙酮‑正己烷、丙酮‑正庚烷或丙酮‑正辛烷中的任意一种为洗脱液，得米尔贝霉素有效组分，然后浓缩得到米尔贝霉素。本方法制备出的米尔贝霉素纯度高且收率高，方法安全且能有效降低有机溶剂的使用量。

主权项

1.一种米尔贝霉素的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将米尔贝霉素湿菌渣于进风温度为105～120℃且出风温度为70～80℃的条件下进行干燥，获得米尔贝霉素干菌渣；步骤2：向步骤1的米尔贝霉素干菌渣添加乙醇进行浸提，得到米尔贝霉素浸提乙醇液；步骤3：用正庚烷与水对步骤2的米尔贝霉素浸提乙醇液进行萃取得萃取液，并将萃取液进行浓缩，制得待上柱液；步骤4：将步骤3的待上柱液用柱层析法进行分离纯化，以柱层析硅胶为固定相，以丙酮‑正庚烷为洗脱液，得米尔贝霉素有效组分，然后浓缩得到米尔贝霉素；步骤4中，洗脱的方法为梯度洗脱，具体包括以下步骤：步骤a：先用3％丙酮‑正庚烷作为洗脱液进行洗脱至米尔贝霉素的色谱纯度为60％，3％丙酮‑正庚烷表示丙酮与正庚烷的体积比为3∶97；步骤b：当米尔贝霉素的色谱纯度为60％后，用3.5％丙酮‑正庚烷作为洗脱液进行洗脱，直至米尔贝霉素的色谱纯度为80％，3.5％丙酮‑正庚烷表示丙酮与正庚烷的体积比为3.5∶96.5；步骤c：当米尔贝霉素的色谱纯度为80％后，用4.0％丙酮‑正庚烷作为洗脱液进行洗脱，直至米尔贝霉素的色谱纯度为90％以上，4.0％丙酮‑正庚烷表示丙酮与正庚烷的体积比为4∶96。