[发明专利]鉴别检测裂谷热病毒的双重荧光定量RT-PCR引物及探针在审

专利信息
申请号: 201910654233.6 申请日: 2019-07-19
公开(公告)号: CN110295254A 公开(公告)日: 2019-10-01
发明(设计)人: 杨蕾蕾;李文良;毛立;郝飞;李基棕;张纹纹;江杰元;孙敏;刘茂军 申请(专利权)人: 江苏省农业科学院
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 程斯佳
地址: 210014 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明提供一种鉴别检测裂谷热病毒的双重荧光定量RT‑PCR引物及探针,属于生物技术领域。本发明设计了一对针对裂谷热病毒L基因的特异性检测引物L‑F、L‑R及一条荧光探针L‑P,一对针对裂谷热病毒S片段的特异性检测引物S‑F、S‑R及一条荧光探针S‑P,并优化了该方法的特异性引物及荧光探针的浓度和反应条件。本发明提供的双重荧光定量RT‑PCR方法可以检测裂谷热病毒的感染,同时可以鉴别裂谷热病毒野生株和NSs缺失株(包括Clone 13及其他缺失株),从而将感染动物同被免疫过的动物区分开来。具有操作简单、灵敏度高、特异性强、重复性好等优点,不仅可以节约成本,还可以为疫情检测和控制争取到宝贵的时间。
搜索关键词: 病毒 双重荧光 荧光探针 特异性检测引物 鉴别检测 探针 生物技术领域 定量RT-PCR 特异性引物 反应条件 感染动物 特异性强 疫情检测 灵敏度 野生株 引物 鉴别 感染 检测 节约 优化
【主权项】:
1.一种鉴别检测裂谷热病毒的双重荧光定量RT‑PCR引物及探针,其特征在于,所述检测裂谷热病毒的通用检测引物及探针的序列分别为:上游引物L‑F:5’‑TGACATACAAGGAGCATCTGAAA‑3’;下游引物L‑R:5’‑GCCAAAGGTGAAATCGTGAAC‑3’;荧光探针L‑P:5’–JOE‑AGGCTCAACTTTGCTACCCTCCAT‑TAMRA‑3’;检测裂谷热病毒非基因缺失株的特异性检测引物及探针的序列分别为:上游引物S‑F:5’‑AGGATGATAGTGACCGAGGCT‑3’;下游引物S‑R:5’‑AATGAGGGCTGAGTTTGGAA‑3’;荧光探针S‑P:5’–FAM‑CCTCAGAGGGATTGACCTGTGCCTGTTGCCA‑TAMRA‑3’。
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