[发明专利]一种重组质粒及其在鉴定嗜酸性喜温硫杆菌基因表达中的应用在审
申请号: | 201910658493.0 | 申请日: | 2019-07-19 |
公开(公告)号: | CN110257413A | 公开(公告)日: | 2019-09-20 |
发明(设计)人: | 陈林旭;陈显轲;高玉辉;林建群;林建强 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N15/65;C12Q1/66 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 李健康 |
地址: | 250061 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种重组质粒,含有tetH启动子、萤火虫荧光素酶基因luc、氯霉素抗性基因cat、复制子oriV、接合转移基因mob、复制蛋白基因repA,repB,repC和卡那霉素抗性基因Kanr元件,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了所述重组质粒在鉴定嗜酸性喜温硫杆菌基因表达中的应用,是利用其构建的重组菌经培养后检测荧光素酶活性,根据荧光值得大小判定嗜酸性喜温硫杆菌基因表达的强度。该方法背景低、灵敏度高,操作简单且具有很高的可重复性、准确度,为实现筛选高效启动子并鉴定嗜酸性自养菌中的基因表达强度进而构建抗逆、高效浸出的工程菌株具有理论指导意义及现实应用价值。 | ||
搜索关键词: | 基因表达 喜温硫杆菌 重组质粒 启动子 构建 萤火虫荧光素酶基因 卡那霉素抗性基因 氯霉素抗性基因 复制蛋白基因 接合转移基因 荧光素酶活性 核苷酸序列 准确度 大小判定 工程菌株 可重复性 理论指导 现实应用 灵敏度 自养 复制子 重组菌 荧光 浸出 应用 筛选 检测 | ||
【主权项】:
1.一种重组质粒,其特征在于:所述重组质粒含有tetH启动子、萤火虫荧光素酶基因luc、氯霉素抗性基因cat、复制子oriV、接合转移基因mob、复制蛋白基因repA,repB,repC和卡那霉素抗性基因Kanr元件,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
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