[发明专利]猪胸膜肺炎放线杆菌的血清分型方法、引物组合及PCR体系有效
申请号: | 201910660119.4 | 申请日: | 2019-07-22 |
公开(公告)号: | CN110373484B | 公开(公告)日: | 2023-05-30 |
发明(设计)人: | 周明光;徐高原;王召贺;汤细彪;金建云;陈章表;陈波;潘建刚 | 申请(专利权)人: | 武汉科前生物股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 乔凤杰 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明提供一种猪胸膜肺炎放线杆菌的血清分型方法、引物组合及PCR体系,本发明为血清1‑15型的猪胸膜肺炎放线杆菌分别设计特异性引物,血清9型和血清11型特异性引物序列相同,共14对特异性引物,将14对特异性引物分成4组,每组3至4对特异性引物,每个PCR体系包括一组引物,整体构成一个多重PCR体系;后以待测血清型的猪胸膜肺炎放线杆菌菌株基因组DNA为模板,分别使用上述四组引物进行PCR检测,结果和参考菌株条带进行比对。本发明设计引物后通过将引物分组后进行多重PCR,可以鉴定出13种血清型的猪胸膜肺炎放线杆菌菌株,在节约鉴定血清型成本的同时准确性高,检出范围大。 | ||
搜索关键词: | 胸膜 肺炎 放线 杆菌 血清 方法 引物 组合 pcr 体系 | ||
【主权项】:
1.猪胸膜肺炎放线杆菌的血清分型方法,其特征在于,包括:针对血清1‑15型的猪胸膜肺炎放线杆菌分别设计特异性引物,其中血清9型和血清11型的所述特异性引物序列相同,共14对特异性引物,序列为:SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.28;将所述14对特异性引物进行分组:G1组包含SEQ ID NO.1‑2、SEQ ID NO.13‑14和SEQ ID NO.21‑22所示序列的特异性引物;G2组包含SEQ ID NO.3‑4、SEQ ID NO.15‑16、SEQ ID NO.17‑18和SEQ ID NO.19‑20所示序列的特异性引物;G3组包含SEQ ID NO.5‑6、SEQ ID NO.7‑8、SEQ ID NO.11‑12和SEQ ID NO.23‑24所示序列的特异性引物;G4组包含SEQ ID NO.9‑10、SEQ ID NO.25‑26和SEQ ID NO.27‑28所示序列的特异性引物;以待测血清型的猪胸膜肺炎放线杆菌菌株基因组DNA为模板,分别使用上述四组引物进行PCR检测,结果和参考菌株条带进行比对。
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