[发明专利]无荧光染料标记外泌体及其制备方法在审
| 申请号： | 201910665088.1 | 申请日： | 2019-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN110423777A | 公开（公告）日： | 2019-11-08 |
| 发明（设计）人： | 梁高峰;景爱华;冯书营;安君岭;冯文坡;郝雪琴;杜景霞;李艳;高社干 | 申请（专利权）人： | 河南科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/65;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人： | 戴凤仪 |
| 地址： | 471000 河南*** | 国省代码： | 河南;41 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种无荧光染料标记外泌体的制备方法，包括，步骤1：构建融合表达绿色荧光蛋白EGFP和外泌体标记蛋白LAMP的重组质粒；步骤2：将重组质粒和转染试剂按比例混合后，转染HEK293细胞，筛选获得稳定表达EGFP标记外泌体的HEK293细胞株；步骤3：从成功标记转染的HEK293细胞株中分离提取含有EGFP标记的外泌体。本发明利用基因工程化的HEK293细胞株，从其培养的上清液中提取含EGFP标记的外泌体，方法简便且外泌体不含荧光染料，利用外泌体的独特功能和EGFP在体内体外示踪的优越性，可避免常规荧光染料标记外泌体因染料扩散干扰荧光观察的弊端，为研究细胞间物质转移机制提供有力工具。 | ||
| 搜索关键词： | 荧光染料标记 重组质粒 转染 制备 绿色荧光蛋白EGFP 按比例混合 细胞间物质 常规荧光 成功标记 独特功能 分离提取 利用基因 染料标记 染料扩散 融合表达 稳定表达 荧光观察 荧光染料 转染试剂 工程化 上清液 体标记 构建 示踪 体外 蛋白 筛选 体内 研究 | ||
【主权项】：
1.一种无荧光染料标记外泌体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：构建融合表达绿色荧光蛋白EGFP和外泌体标记蛋白LAMP的重组质粒；步骤2：将所述重组质粒和转染试剂按比例混合后，转染HEK293细胞，筛选获得稳定表达EGFP的HEK293细胞株；步骤3：从步骤2成功转染EGFP重组质粒的HEK293细胞培养上清液中分离外泌体，得到含有EGFP标记的外泌体。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于河南科技大学，未经河南科技大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910665088.1/，转载请声明来源钻瓜专利网。
