[发明专利]基于杜氏藻代谢途径的β-胡萝卜素高产工程菌及其构建方法与应用有效
| 申请号： | 201910665228.5 | 申请日： | 2019-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN110499272B | 公开（公告）日： | 2021-03-30 |
| 发明（设计）人： | 姜建国;陈浩宏;谢红;梁志聪 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/53;C12N15/54;C12N15/61;C12P23/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 崔红丽 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开一种基于杜氏藻代谢途径的β‑胡萝卜素高产工程菌及其构建方法与应用，涉及基因工程菌领域。本发明第一次实现全部利用来自杜氏藻(如杜氏巴氏藻或杜氏盐藻)的类胡萝卜素途径的基因来构建出高产β‑胡萝卜素的工程菌。当杜氏藻为杜氏巴氏藻时，所述β‑胡萝卜素高产工程菌的β‑胡萝卜素的产率为2.7mg/g(细胞干重)；当杜氏藻为杜氏盐藻时，所述β‑胡萝卜素高产工程菌的β‑胡萝卜素的产率为3.3mg/g(细胞干重)。本发明采用的载体的启动子都是T7启动子，包含lacZ调控元件，其在IPTG作用的大肠杆菌BL21(DE3)中能够高表达，这有利于β‑胡萝卜素的大量积累，可用于实际应用生产。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 杜氏藻 代谢 途径 胡萝卜素 高产 工程 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种基于杜氏藻代谢途径的β-胡萝卜素高产工程菌，其特征在于：/n基于杜氏巴氏藻(Dunaliella bardawil)代谢途径时，所述β-胡萝卜素高产工程菌含有编码GenBank：APW83740.1所示氨基酸序列的牦牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶Ggps基因、编码SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的八氢番茄红素合成酶Psy基因、编码GenBank：ADD52599.1所示氨基酸序列的八氢番茄红素脱氢酶Pds基因、编码SEQ ID NO：4所示氨基酸序列的15-顺式-ζ-胡萝卜素异构酶Ziso基因、编码SEQ ID NO：6所示氨基酸序列的ζ-胡萝卜素脱氢酶Zds基因、编码SEQ ID NO：8所示氨基酸序列的类胡萝卜素异构酶Crtiso基因和编码GenBank：ANY98896.1所示氨基酸序列的番茄红素β-环化酶Lycb基因；/n基于杜氏盐藻(Dunaliella saline)代谢途径时，所述β-胡萝卜素高产工程菌含有编码SEQ ID NO：10所示氨基酸序列的牦牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶Ggps基因、编码GenBank：AAB51287.1所示氨基酸序列的八氢番茄红素合成酶Psy基因、编码GenBank：CAA75094.1所示氨基酸序列的八氢番茄红素脱氢酶Pds基因、编码SEQ ID NO：12所示氨基酸序列的15-顺式-ζ-胡萝卜素异构酶Ziso基因、编码SEQ ID NO：14所示氨基酸序列的ζ-胡萝卜素脱氢酶Zds基因、编码SEQ ID NO：16所示氨基酸序列的类胡萝卜素异构酶Crtiso基因和编码GenBank：ADX41685.1所示氨基酸序列的番茄红素β-环化酶Lycb基因。/n
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