[发明专利]一种适用于聚球藻的生物封存系统、构建方法及应用有效
| 申请号： | 201910668051.4 | 申请日： | 2019-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN110438053B | 公开（公告）日： | 2022-03-11 |
| 发明（设计）人： | 陈磊;周宇晴;孙韬;陈子熙;宋馨宇;张卫文 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/74;C12R1/01 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 曹玉平 |
| 地址： | 300350 天津市津南区海*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种适用于聚球藻的生物封存系统、构建方法及应用，构建为：从聚球藻7942中获得毒性基因sepT2、抗毒基因sepA2及缺铁诱导启动子PisiAB，从集胞藻6803中获得启动子PpsbA2；从整合型质粒pBA3031中扩增得到终止子Trbcl；以pBR322为载体，用缺铁诱导启动子PisiAB表达毒性基因sepT2，用终止子Trbcl终止转录；用启动子PpsbA2表达抗毒基因sepA2，构建质粒并转入聚球藻。本发明的系统，在非诱导情况下正常生长，诱导后迅速死亡。这对聚球藻的生物封存系统发展与优化具有重要的理论及实际意义，也为解决其它蓝细菌的生物安全问题提供了借鉴。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 适用于 聚球藻 生物 封存 系统 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.适用于聚球藻的生物封存系统的构建方法，其特征是包括如下步骤：(1)从聚球藻7942中获得毒性基因sepT2、抗毒基因sepA2以及缺铁诱导启动子PisiAB，从集胞藻6803中获得启动子PpsbA2；从整合型质粒pBA3031中扩增得到终止子Trbcl；所述毒性基因sepT2的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；所述抗毒基因sepA2的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；所述缺铁诱导启动子PisiAB的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；所述启动子PpsbA2的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；所述终止子Trbcl的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示；(2)以pBR322为载体，用缺铁诱导启动子PisiAB表达毒性基因sepT2，用终止子Trbcl终止转录；用启动子PpsbA2表达抗毒基因sepA2，构建质粒pBR322‑A2/T2；(3)将所述质粒pBR322‑A2/T2转入聚球藻。
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