[发明专利]一种猪细小病毒7型SYBR Green I荧光定量PCR检测方法在审
申请号: | 201910670437.9 | 申请日: | 2019-07-24 |
公开(公告)号: | CN111690769A | 公开(公告)日: | 2020-09-22 |
发明(设计)人: | 王勇;赵靓;王小朋;杨侃侃;张达;白彩霞;孙裴 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851 |
代理公司: | 安徽申策知识产权代理事务所(普通合伙) 34178 | 代理人: | 程艳梅 |
地址: | 230031 安徽省*** | 国省代码: | 安徽;34 |
权利要求书: | 暂无信息 | 说明书: | 暂无信息 |
摘要: | 本发明公开了一种猪细小病毒7型SYBR Green I荧光定量PCR检测方法,包括如下步骤:S1、制备特异性引物;根据Gen Bank登录的PPV7(Gen Bank:KU563733.1)Cap基因核苷酸序列,设计用于PPV7的特异性引物(F1、R1);PPV7特异性引物上游引物F1:PPV7‑F1(5'‑GCGACCAGTCGAAAGTCTTC‑3'),PPV7特异性引物下游引物R1:PPV7‑R1(5'‑TTGGTGTTGCCCATTCTGTA‑3'),扩增核酸片段大小为169bp;S2、重组质粒标准品制备并提取DNA;本发明为建立一种能够快速、特异、敏感、简便、特异性好的检测猪细小病毒7型的SYBR Green I荧光定量PCR方法,本发明根据Gen Bank登录的PPV7(Gen Bank:KU563733.1)Cap基因核苷酸序列,设计一对用于PPV7的特异性引物,扩增169bp的PPV7衣壳蛋白基因,构建重组质粒,以其作为标准品建立了SYBR Green I荧光定量PCR检测方法,得到标准曲线、溶解曲线,并对灵敏性、特异性和重复性进行验证。 | ||
搜索关键词: | 种猪 细小 病毒 sybr green 荧光 定量 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】:
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