[发明专利]SVA、FMDV、SVDV和VSV的一步法多重实时荧光定量PCR检测引物和探针

摘要

本发明公开了一种SVA、FMDV、SVDV和VSV的一步法多重实时荧光定量PCR检测引物和探针，属于生物技术检测领域。并基于提供的引物和探针开发出了用于同时检测SVA、FMDV、SVDV和VSV的试剂盒。本发明提供的试剂盒和检测方法操作简便、特异性强、敏感性高、重复性好，可以实现对SVA、FMDV、SVDV和VSV同时准确定性和定量检测，将在SVA、FMDV、SVDV和VSV的检测及疫苗生产、例如疫苗生产过程中的质量监控和合理化配苗中发挥重要作用，应用前景广阔。

主权项

1.用于对SVA、FMDV、SVDV和VSV进行多重实时荧光定量PCR检测的引物和Taqman探针，其特征在于：用于检测SVA的上游引物(SVA1‑F)和下游引物(SVA1‑R)，所述上游引物(SVA1‑F)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：5所示，下游引物(SVA1‑R)的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：6所示；用于对SVA进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(SVA1‑P)，所述TaqMan探针(SVA1‑P)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：7所示；用于检测FMDV的上游引物(FMDV1‑F)和下游引物(FMDV1‑R)，所述上游引物(FMDV1‑F)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：8所示，下游引物(FMDV1‑R)的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：9所示；用于对FMDV进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(FMDV1‑P)，所述TaqMan探针(FMDV1‑P)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：10所示；用于检测SVDV的上游引物(SVDV1‑F)和下游引物(SVDV1‑R)，所述上游引物(SVDV1‑F)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：11所示，下游引物(SVDV1‑R)的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：12所示；用于对SVDV进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(SVDV1‑P)，所述TaqMan探针(SVDV1‑P)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：13所示；用于检测VSV的上游引物(VSV1‑F)和下游引物(VSV1‑R)，所述上游引物(VSV1‑F)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：14所示，下游引物(VSV1‑R)的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：15所示；用于对VSV进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针(VSV1‑P)，所述TaqMan探针(VSV1‑P)的核苷酸序列如序列表中SED ID NO：16所示；所述探针为经过荧光标记的，其5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团；且对四种病毒检测探针所标记的荧光报告基团不相同。