[发明专利]一种新的细胞冻存方法在审
| 申请号： | 201910674185.7 | 申请日： | 2019-07-25 |
| 公开（公告）号： | CN110301432A | 公开（公告）日： | 2019-10-08 |
| 发明（设计）人： | 王金涛;向洋 | 申请（专利权）人： | 上海轩锋生物科技有限公司 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 200120 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种新的细胞冻存方法，包括以下步骤：配置细胞冻存液；将配置好的冻存液使用滤头过滤除菌，置于4℃的储存环境中预冷待用；对需要进行冻存的细胞进行计数；对PBMC进行分离，并将分离好的PBMC使用PBS洗涤两遍，取400g洗涤后的溶液离心5分钟，弃去上清；使用冻存液充分悬浮细胞至期望浓度，然后分装至冻存管；将冻存管置于程序降温盒中，然后将降温盒转移到超低温冰箱中；三小时后，将细胞转移到液氮中，整个转移过程应在液氮环境下进行。本发明所包含的冻存方法使复苏后的PBMC中，NK细胞的活力大幅提高，可以为下游的实验提供优质的细胞。有很大的学术意义。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞冻存 冻存管 冻存液 冻存 超低温冰箱 程序降温盒 细胞冻存液 细胞 过滤除菌 溶液离心 细胞转移 悬浮细胞 学术意义 液氮环境 降温盒 分装 滤头 液氮 配置 洗涤 储存 复苏 期望 | ||
【主权项】：
1.一种新的细胞冻存方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、配置细胞冻存液，所述细胞冻存液包括：DMSO7.5％，维生素C 109mg/L，海藻多糖72mg/L，香菇多糖45mg/L，人血清白蛋白500mg/L，高糖DMEM92.5％；步骤2、将步骤1中配置好的冻存液使用滤头过滤除菌，置于4℃的储存环境中预冷待用；步骤3、对需要进行冻存的细胞进行计数；步骤4、对PBMC进行分离，并将分离好的PBMC使用PBS洗涤两遍，取400g洗涤后的溶液离心5分钟，弃去上清；步骤5、使用步骤2中的冻存液充分悬浮细胞至期望浓度，然后分装至冻存管；步骤6、将冻存管置于程序降温盒中，然后将降温盒转移到超低温冰箱中；步骤7、三小时后，将细胞转移到液氮中，整个转移过程应在液氮环境下进行。
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