[发明专利]一种铁皮石斛悬浮细胞的分离和培养方法有效
申请号: | 201910674436.1 | 申请日: | 2019-07-24 |
公开(公告)号: | CN110317773B | 公开(公告)日: | 2021-04-13 |
发明(设计)人: | 吴冬;智强 | 申请(专利权)人: | 江苏赛清科技有限公司;浙江赛时科技有限责任公司 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;C12N5/02;C12N13/00 |
代理公司: | 北京知汇林知识产权代理事务所(普通合伙) 11794 | 代理人: | 董涛 |
地址: | 210043 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 一种铁皮石斛悬浮细胞的分离和培养方法,该方法包括以下步骤:分离和培养铁皮石斛根部组织细胞,静止中心高端粒酶活性细胞的悬浮培养,以及大规模悬浮培养。本发明克服了铁皮石斛离体材料容易褐化,无法规模化连续培养的问题,筛选出其根部静止中心高端粒酶活性的细胞,在一定条件下增殖量大,且细胞活性强,保持常年稳定的大规模铁皮石斛细胞悬浮培养连续扩增体系。 | ||
搜索关键词: | 一种 铁皮 石斛 悬浮 细胞 分离 培养 方法 | ||
【主权项】:
1.一种铁皮石斛悬浮细胞的分离和培养方法,其特征在于,包括以下步骤:1)铁皮石斛外植体细胞分离,接种到WPM预培养基中培养;2)将外植体进行高渗处理或者超声处理,以提高细胞端粒酶活性提高,处理后接种至诱导培养基中;3)经诱导培养,取静止中心高端粒酶活性的细胞,使细胞颗粒化,接种至悬浮培养基上悬浮培养;4)筛选出生长较快,形态单一的悬浮细胞于悬浮培养生物反应器中进行扩增。
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