[发明专利]一种山苦荬药材指纹图谱检测方法及其指纹图谱

摘要

本发明涉及中药材的指纹图谱技术领域，具体涉及一种山苦荬药材指纹图谱检测方法及其指纹图谱，包括以下步骤：（1）混合对照品溶液的制备，（2）供试品溶液的制备，(3)HPLC检测，(4)对照指纹图谱的建立，(5)指纹图谱的质量控制。利用本发明山苦荬药材指纹图谱检测方法及其指纹图谱能够监控山苦荬药材的质量及鉴别真伪，确保药材的真实、安全、有效、稳定和一致性，为山苦荬质量控制提供全面的评价方法和山苦荬药材资源的开发提供科学依据，完善山苦荬药材的质量评价体系。

主权项

1.一种山苦荬药材指纹图谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）混合对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品11.59mg，咖啡酸对照品6.72mg、木樨草苷对照品13.60mg，分别置25ml量瓶中，加适量甲醇超声使溶解并稀释至刻度，摇匀，再分别精密量取上述绿原酸贮备液1.5ml、咖啡酸贮备液1.5ml和木樨草苷贮备液6.0ml，置同一10ml量瓶中并用甲醇定容，摇匀，即得混合对照品溶液；（2）供试品溶液的制备：取山苦荬样品2g，精密称定，置于150mL锥形瓶中，分别精密加入体积浓度为80%的甲醇溶液20mL，称定重量，进行超声提取60min，用体积浓度为80%的甲醇溶液补足损失重量，滤过，取续滤液过0.45nm微孔滤膜，即得；(3)HPLC检测：色谱条件为用Atlantis T3 C₁₈，4.6mm×250mm,5μm色谱柱；以甲醇‑0.2%磷酸水溶液为流动相，流速：1.0mL•min^‑1，进样量：10µL，采用以下梯度洗脱的条件进行梯度洗脱：(4)对照指纹图谱的建立：按照色谱条件，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，记录色谱图，以木犀草苷峰作为参照峰，测定10批山苦荬药材的指纹图谱，对所得色谱数据进行处理，得到由其共有特征峰构成的山苦荬药材的对照指纹图谱，以确定的参照峰的保留时间和峰面积为基准，计算其它共有色谱峰的相对保留时间与相对峰面积，所述对照指纹图谱中，共有峰有16个，其中10号峰为木犀草苷峰； (5)指纹图谱的质量控制：取待测药材制备供试品溶液，按上述色谱条件，将供试品溶液注入高效液相色谱仪检测，将所得色谱图与上述山苦荬药材的对照指纹图谱比较，计算相似度，识别所具有的共同吸收峰的数量，确定相似度，实现对山苦荬药材进行鉴别及质量控制。