[发明专利]一种昆虫致敏蛋白的筛选方法在审
| 申请号： | 201910681957.X | 申请日： | 2019-07-26 |
| 公开（公告）号： | CN110297095A | 公开（公告）日： | 2019-10-01 |
| 发明（设计）人： | 王南溪;杨伟;杨桦;杨春平;方睿;钱丽芝;朱晓庆;管凤荣;王保新 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N30/02;G01N27/447 |
| 代理公司： | 成都九鼎天元知识产权代理有限公司 51214 | 代理人： | 刘小彬 |
| 地址： | 611131 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种昆虫致敏蛋白的筛选方法，解决现有技术中没有高效、准确地筛选昆虫致敏蛋白的方法。本发明的筛选方法包括：步骤1：提取昆虫总蛋白后分离纯化，得到不同的蛋白组分样品；步骤2：采集对昆虫有、无过敏史的人体血清，采用蛋白微阵列实验从步骤1得到的不同蛋白组分样品中筛选出产生过敏反应的蛋白样品；步骤3：在步骤1得到的蛋白组分样品中选择包括产生过敏反应的蛋白样品的多个蛋白组分样品，用免疫印迹试验再次筛选出产生免疫反应的蛋白组分，并确定其分子量；步骤4.对步骤3筛选出的蛋白组分进行测序、检索，确定其氨基酸序列，检索出对应的基因序列，并分析序列的基本性质。本发明能高效、准确地筛选昆虫致敏蛋白。 | ||
| 搜索关键词： | 蛋白 筛选 昆虫 组分样品 致敏 蛋白样品 过敏 检索 免疫印迹试验 氨基酸序列 蛋白微阵列 分离纯化 基因序列 人体血清 过敏史 总蛋白 测序 采集 分析 | ||
【主权项】：
1.一种昆虫致敏蛋白的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1.提取分离：提取昆虫总蛋白，而后进行分离纯化，得到不同的蛋白组分样品；步骤2.初步筛选：采集对所述昆虫有过敏史的血清、以及对所述昆虫无过敏史的血清，采用蛋白微阵列实验，对步骤1得到的不同蛋白组分样品进行筛选，初步筛选出产生过敏反应的蛋白样品；步骤3.二次筛选：在步骤1得到的蛋白组分样品中，选择包括所述产生过敏反应的蛋白样品在内的多个蛋白组分样品，采用免疫印迹试验，筛选出产生免疫反应的蛋白组分，并确定其分子量；步骤4.测序：对步骤3筛选出的蛋白组分进行测序、检索，确定其氨基酸序列，根据该氨基酸序列检索出对应的基因序列，并进行序列的基本性质分析。
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