[发明专利]一种鹿茸草无菌高效育苗方法

摘要

本发明公开了一种鹿茸草无菌高效育苗方法，本发明通过种子处理、表面灭菌消毒、接种及移栽等步骤，使得鹿茸草种子萌发率最高达到100%，移栽成活率达到86%；采用该接种方法，可使鹿茸草种子较均匀分布于培养基中，培养出的无菌苗健壮、长势整齐，能够有效获取清洁种子，打破种子休眠，保证种子表面消毒效果，使得种子均匀分散于培养基表面，且操作简单易行，能够提高种子的利用率，在短时间内获得大量鹿茸草幼苗，可有效保护野生鹿茸草植物资源。

主权项

1.一种鹿茸草无菌高效育苗方法，其特征在于：包括步骤如下：/n（1）种子采集：根据蒴果颜色和状态断定果实成熟，即蒴果由绿色变为黄色或黄褐色且尖端微裂；/n（2）种子处理：蒴果用手轻轻搓去果皮，收集种子密封、保存备用；/n（3）将收集的鹿茸草种子采用重力法将干瘪种子漂掉；/n（4）灭菌前期准备：将5ml离心管和枪头分别用报纸包裹，与蒸馏水和装有滤纸的培养皿一起高压灭菌；/n（5）培养基配制：种子无菌萌发培养基为：MS+BA0～0.5+NAA0～0.01mg/L+30g/L蔗糖+3.7g/L琼脂粉；/n（6）鹿茸草种子表面灭菌及接种：/na、在超净工作台上，将待灭菌的种子转移到5ml离心管中，用移液枪吸取一定量75%酒精浸泡30s，用平口的移液枪头吸出酒精，然后用灭菌蒸馏水润洗3-5次；/nb、用移液枪吸取一定量0.1%升汞，灭菌6-10min，再用灭菌蒸馏水润洗3-5次；为保证种子与灭菌剂充分混合，在酒精和升汞浸泡期间用移液枪反复吹打；/nc、按种子与无菌水体积比为1:20混合，用平口移液枪吸取300-500ul混悬液至灭菌滤纸上，然后将接种有种子的滤纸倒铺于培养基上，最后将滤纸轻轻揭开，种子即可较均匀分散于培养基中；/nd、种子播种于不同的萌发培养基中，按上述比例混合，每瓶可接种100粒左右，置于光照强度1500-2000lx，光照时间12h/d，培养温度25±2℃；/ne、接种10d后种子即可萌发，培养50d后可获得株高1.5cm左右，根长0.5-2.0cm的鹿茸草组培苗，生根率达95%以上；/n（7）生根组培苗炼苗及移栽：/n将所得到的鹿茸草生根组培苗的培养瓶置于室外3-5d，在此期间，温度控制在25～30℃，然后取出培养瓶内的鹿茸草组培苗，用清水漂洗掉其基部的培养基，移栽前速蘸浓度为1‰的甲基托布津杀菌溶液和1%的ABT溶液，栽植于炼苗基质中，移栽成活率达86.36%。/n