[发明专利]pH值响应两性离子透明质酸胶束递送阿霉素方法及应用

摘要

本发明属于两性离子纳米药物载体与药物输送技术领域，pH值响应两性离子透明质酸胶束递送阿霉素方法及应用。通过对纳米材料修饰改性，利用肿瘤组织的特异性，以化学偶联或者包封的方式将抗肿瘤药物包埋到纳米药物载体中，以期能够实现药物在不同组织间的特异性分布，在达到高效给药的目的的同时降低药物对正常组织的损伤。本发明合成了新型的两性离子纳米材料dHAD，通过自组装形成的pH响应性胶束，用于递送疏水性抗肿瘤药物阿霉素，在药物载体领域展现了广阔的前景。

主权项

1.pH值响应两性离子透明质酸胶束递送阿霉素方法，其特征是，包括如下步骤：/n(1)去乙酰化的透明质酸两性离子多糖dHA的制备：制备反应物；100-300mL乙醇对反应物进行沉淀，并在4℃静置6h以上；抽滤后得到沉淀，真空干燥24h以上；将中间产物溶于15-25mL冰乙酸中，加入5-15mL碘酸，4℃静置2h以上，然后加入1-10mL氢碘酸搅拌15min以上；反应液用无水乙醚萃取，然后用去离子水透析，将透析液冷冻干燥，得到去乙酰化的透明质酸两性离子多糖dHA；/n(2)pH值响应两性离子的透明质酸聚合物dHAD的制备：取去乙酰化的透明质酸两性离子多糖溶于去离子水中，然后加入4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐(DMTMM)作为缩合剂，滴加N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)调节溶液pH值，-4℃冰浴条件下搅拌2h以上；随后将反应温度升至室温，将十二胺溶于四氢呋喃中，缓慢滴加至上述溶液中，在氮气保护条件下，室温反应24h以上；将反应液透析，冻干，得到pH值响应两性离子的透明质酸聚合物dHAD；/n(3)通过超声透析法制备pH值响应两性离子的透明质酸聚合物-阿霉素dHAD-DOX载药胶束：首先，对阿霉素盐酸盐(DOX·HCl)进行脱盐处理；将DOX·HCl溶解在3-5mL甲醇中并加入三乙胺(TEA)，在室温下避光搅拌24h以上，将反应溶液在30-50℃下进行旋转蒸发并进行冷冻干燥，得到脱盐阿霉素(DOX)；取dHAD聚合物分散在等重量比的PBS缓冲液中，并将DOX溶解在与其等重量比的甲醇中，然后边搅拌边将DOX的甲醇溶液缓慢注入聚合物溶液中；将混合溶液置于37℃的恒温摇床上振荡4h；将最终的混合溶液通过透析袋(MWCO7000Da)用去离子水透析48h以上，冻干并在4℃下保存；/n所述步骤(1)中制备反应物具体步骤为：称取透明质酸钠和硫酸联氨，随后加入的水合肼溶液进行溶解，氮气保护50-70℃反应72h以上；或者为：称取NaOH，溶于去离子水中，然后加入透明质酸，氮气保护下65-75℃油浴反应6-12h；NaOH为40％NaOH，透明质酸与NaOH的质量比范围是1:20-40。/n