[发明专利]一种鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF66蛋白重组杆状病毒表达载体及其制备方法在审
| 申请号： | 201910699686.0 | 申请日： | 2019-07-31 |
| 公开（公告）号： | CN110408655A | 公开（公告）日： | 2019-11-05 |
| 发明（设计）人： | 李强;栾林林 | 申请（专利权）人： | 盐城工学院 |
| 主分类号： | C12N15/866 | 分类号： | C12N15/866;C12N15/66;C12N15/38 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 吴爽 |
| 地址： | 224051 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF66蛋白重组杆状病毒表达载体及其制备方法，其是以提取的CyHV‑2 cDNA为模板，扩增出ORF66基因，将扩增的ORF66基因连接至杆状病毒载体pFastBacHTA中，构建重组杆状病毒载体pFastBac HTA‑CyHV‑ORF66，转化至大肠杆菌感受态细胞DH10Bac中，获得重组穿梭杆粒rBacmid‑CyHV‑ORF66，鉴定正确后将其转染至Sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒，并将重组杆状病毒进行传代扩增，将高滴度的含有CyHV‑2‑ORF66基因的杆状病毒接种到sf9昆虫细胞中进行CyHV‑2‑ORF66蛋白的真核表达。选用本发明方法构建鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF66蛋白重组杆状病毒表达载体，并利用重组杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF66蛋白，为制备鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF66蛋白特异性单抗提供了材料，为鲤疱疹病毒血清学ELISA检测方法的建立奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 疱疹病毒Ⅱ型 杆状病毒表达载体 蛋白重组 扩增 制备 重组杆状病毒 蛋白 构建 大肠杆菌感受态细胞 重组杆状病毒表达 重组杆状病毒载体 传代 杆状病毒载体 杆状病毒 基因连接 昆虫细胞 真核表达 疱疹病毒 高滴度 血清学 基因 单抗 杆粒 转染 接种 转化 | ||
【主权项】：
1.一种鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF66蛋白重组杆状病毒表达载体，其特征在于，该重组杆状病毒表达载体的核苷酸序列为SEQ ID NO：1。
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