[发明专利]基于自体脂肪干细胞外泌体的制备及美容方法

摘要

基于自体脂肪干细胞外泌体的制备及美容方法，它包含如下步骤：一、健康的客户的选择；二、腹部和臀部自体脂肪组织的选择；三、脂肪干细胞的制备；四、脂肪干细胞外泌体的制备的富集；五、脂肪干细胞外泌体的表皮和真皮的美容；采用本发明方法制备的基于自体脂肪干细胞外泌体，能有效利用自体组织，具有易于操作、无免疫原性反应风险、活性高、效果明显、制备成本低廉、可操作性强等优点。

主权项

1.基于自体脂肪干细胞外泌体的制备及美容方法，其特征在于它包含如下步骤：一、健康的客户的选择：选择18‑45岁健康人士，男女均可，首先体检，采集其的外周血，用化学发光方法检测乙肝、丙肝、梅毒、艾滋、EB病毒、嗜热T细胞病毒为阴性即为合格；二、腹部和臀部自体脂肪组织的选择：合格后的人士，在医院做吸脂手术，采用无菌方法提取腹部和臀部的150毫升自体脂肪组织，缝合、腹带压迫塑形；将自体脂肪组织迅速放到含有庆大霉素的PBS缓冲液皮肤保存液中；三、脂肪干细胞的制备：在GMP制备车间中，150毫升自体脂肪组织放入3个50毫升离心管中，分别加入10毫升的3mg/ml的胶原蛋白酶I和5毫升的0.25%胰酶消化180分钟，再加入血清的DMEM/F12培养基终止消化 、离心、弃掉上清，在细胞沉淀中加入20毫升无血清细胞培养基中培养，每5天换液，第15‑20天，观察到梭形细胞长出，7‑8个克隆的时候可以传代、冻存；四、脂肪干细胞外泌体的制备的富集：取对数期细胞，2000转离心，去上清；加入胰酶消化、离心、去上清，加入不含血清替代物的培养基1:10传代，5天以后，收集所有上清，10000转高速离心，取沉淀，检测，冻存，使用前5天，融化；五、脂肪干细胞外泌体的表皮和真皮的美容；生活美容的方法：洁面，采用钒钛微晶无针水光仪表皮导入；医疗美容的方法：洁面，敷麻膏，去除麻膏，碘伏消毒，脱碘，采用0.8‑1.2mm深度水光针将脂肪干细胞外泌体导入，及时用干棉签压迫；医用冷敷贴敷面15分钟，修复真皮组织。