[发明专利]缺失21个编码胞外多糖合成基因的基因工程菌及其应用有效

专利信息
申请号: 201910701830.X 申请日: 2019-07-31
公开(公告)号: CN110387346B 公开(公告)日: 2021-01-29
发明(设计)人: 王小元;王建莉;马文渐;王甜忆;周晴;汪晨卉;李烨 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12P7/62;C12R1/19
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 张勇
地址: 214000 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了缺失21个编码胞外多糖合成基因的基因工程菌及其应用,属于基因工程和发酵工程领域。本发明采用CRISPR/Cas9敲除系统敲除大肠杆菌W3110基因组上负责胞外多糖合成和转运的21个基因得到突变菌WJW09,采用WJW09菌株为宿主菌,利用pBHR68异源表达PHB合成基因簇phaCAB,WJW09/pBHR68合成PHB可以达到细胞干重的57.2%,而W3110/pBHR68合成的PHB仅占细胞干重的1.5%。重组菌WJW09/pBHR68的PHB体积产量高达对照菌W3110/pBHR68(1.5%)的38倍。
搜索关键词: 缺失 21 编码 多糖 合成 基因 基因工程 及其 应用
【主权项】:
1.一种生产聚3‑羟基丁酸酯(PHB)的重组菌,其特征在于,敲除大肠杆菌基因组上21个编码胞外多糖合成和转运基因,并将β‑酮基硫解酶、乙酰辅酶A还原酶和PHB合成酶的编码基因转化到菌株中;所述21个编码胞外多糖合成和转运基因分别为wza,wzb,wzc,wcaA,wcaB,wcaC,wcaD,wcaE,wcaF,gmd,wcaG,wcaH,wcaI,manC,manB,wcaJ,wzx,wcaK,wcaL,wcaM,galF。
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