[发明专利]一种产油丝状真菌遗传改造菌株的快速筛选方法

摘要

本发明公开了一种产油丝状真菌遗传改造菌株的快速筛选方法，属于微生物技术领域。本发明以表征脱氢酶活性的氯化三苯基四氮唑(TTC)为筛选指示剂并在筛选培养基中进行应用，确定了这一培养基的配方和使用方法，建立了一种在产油微生物遗传改造实验中快速区分及挑选转化子的培养基和实验方法。所述筛选方法能够准确且高效地区分转化子与非转化子，缩短重组菌株筛选的时间，所获转化子均为阳性，可正常生长及产脂，为产油微生物的遗传改造实验提供了极大便利。

主权项

1.一种筛选经过遗传改造的产油丝状真菌的方法，其特征在于，所述遗传改造包括基因过表达、RNA干扰和/或基因敲除，所述产油丝状真菌是不具备特定抗生素抗性的或者营养缺陷型的高山被孢霉(Mortierella alpina)、卷枝毛霉(Mucor circinelloides)或深黄被孢霉(Mortierella isabellina)；所述方法包括以下步骤：将待筛选菌株在筛选培养基上培养，使得未成功实现遗传改造的营养缺陷型菌株或未成功实现遗传改造的不具备特定抗生素抗性的菌株丧失活性，然后，向筛选培养基中添加氯化三苯基四氮唑或者将待筛选菌株转移至含氯化三苯基四氮唑的筛选培养基中培养，挑选繁殖得到的粉色或红色菌落，即为成功实现遗传改造的恢复生长因子合成能力或具有相应抗生素抗性的菌株；所述筛选培养基是全合成培养基或者含抗生素的培养基。