[发明专利]一种纳他霉素完全抗原的制备方法有效
申请号: | 201910715945.4 | 申请日: | 2019-08-05 |
公开(公告)号: | CN110437330B | 公开(公告)日: | 2022-11-18 |
发明(设计)人: | 郑炜;赵雷;徐颖 | 申请(专利权)人: | 宁波海关技术中心 |
主分类号: | C07K14/765 | 分类号: | C07K14/765;C12N15/81;C12N9/10 |
代理公司: | 宁波奥圣专利代理有限公司 33226 | 代理人: | 何仲 |
地址: | 315012 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种纳他霉素完全抗原的制备方法,特点是包括以下步骤:(1)将己二酸溶于MES溶液,然后依次加入碳二酰亚胺盐酸盐和N‑羟基硫代琥珀酰亚胺室温振荡后,加入中性粒细胞明胶转移酶或牛血清白蛋白的MES溶液,室温振荡;然后加入碘代乙酰胺反应,过夜透析即获得改性后的载体蛋白;(2)取改性载体蛋白加入的碳二酰亚胺盐酸盐和的N‑羟基硫代琥珀酰亚胺,轻轻振荡后置于冰上,加入含纳他霉素的50wt%DMSO水溶液,室温振荡2小时,在PB溶液中过夜透析,即得纳他霉素完全抗原,优点是长期放置不易凝聚。 | ||
搜索关键词: | 一种 霉素 完全 抗原 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种纳他霉素半抗原的制备方法,其特征在于包括以下步骤:(1)载体蛋白改性将20mg的己二酸溶于5mL的pH值为6.5的MES溶液,然后依次加入50mg的碳二酰亚胺盐酸盐和50mg的N‑羟基硫代琥珀酰亚胺,室温缓慢振荡20分钟后,加入5mL含20mg 中性粒细胞明胶转移酶或牛血清白蛋白的MES溶液,室温缓慢振荡2小时;然后加入2mg的碘代乙酰胺,反应两小时,在20mM MES溶液中过夜透析,透析两次,即获得改性后的载体蛋白;(2)完全抗原合成取10mg的改性载体蛋白牛血清白蛋白,加入0.04mg的碳二酰亚胺盐酸盐和0.05mg的N‑羟基硫代琥珀酰亚胺;或者取10mg的改性载体蛋白中性粒细胞明胶转移酶,加入0.08 mg的碳二酰亚胺盐酸盐和0.1mg的N‑羟基硫代琥珀酰亚胺;轻轻振荡20min后,置于冰上,加入含5mg的纳他霉素的50wt% DMSO水溶液,室温振荡2小时,在20mM pH为7.4的PB溶液中过夜透析,即得纳他霉素半抗原。
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