[发明专利]人体液中抗LGI1自身抗体的检测材料、制备方法及应用在审
| 申请号： | 201910738530.9 | 申请日： | 2019-08-12 |
| 公开（公告）号： | CN110606882A | 公开（公告）日： | 2019-12-24 |
| 发明（设计）人： | 闫亚平;李怡婷;李科 | 申请（专利权）人： | 陕西脉元生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/47 | 分类号： | C07K14/47;C07K1/14;C12N15/867;G01N33/531;G01N33/564 |
| 代理公司： | 61216 西安恒泰知识产权代理事务所 | 代理人： | 李婷;金艳婷 |
| 地址： | 710003 陕西省西安*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了人体液中抗LGI1自身抗体的检测材料、制备方法及应用，本发明将LGI1抗原包被于载体膜上制成抗LGI1受体检测材料，人血清和脑脊液中的特异性LGI1抗体会与抗原结合，利用碱性磷酸酶底物‑配体反应进行显色，并在显色反应中加入本发明的封闭材料，可用通过肉眼观察直接判断检测样品中是否含有LGI1抗体。该方法具有灵敏度高，操作简便，快速检测等优点，有助于抗LGI1受体脑炎的识别和诊断。 | ||
| 搜索关键词： | 碱性磷酸酶底物 封闭材料 检测材料 检测样品 抗原包被 抗原结合 快速检测 受体检测 显色反应 自身抗体 脑炎 灵敏度 脑脊液 人体液 人血清 载体膜 抗体 可用 配体 显色 制备 诊断 应用 | ||
【主权项】：
1.人体液中抗LGI1自身抗体的检测材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤1，获取LGI1的CDS序列及其信号肽序列作为目的基因，将带有酶切位点的两个目的基因分别插入17T2A质粒载体中，得到重组质粒载体17T2A-LGI1；/n其中，17T2A质粒载体包括含氨苄青霉素抗性基因AmpR序列、原核复制子pUC Ori序列、病毒复制子SV4 0O ri序列、RSV启动子、慢病毒5’LTR、慢病毒3’LTR、Gag顺式元件、RRE顺式元件、env顺式元件、cPPT顺式元件、eWPRE增强型土拨鼠乙肝病毒转录后调控元件、CMV启动子、MCS多克隆位点以及T2A元件；/n步骤2，将重组质粒载体17T2A-LGI1转染入293T细胞中，得到17T2A-LGI1-293T细胞；/n步骤3，裂解17T2A-LGI1-293T细胞，提取其胞浆蛋白，使用PEG沉淀法提取胞浆蛋白中的LGI1抗原；/n步骤4，将步骤3提取得到的LGI1抗原固化在载体膜上，得到人体液中抗LGI1自身抗体的检测材料。/n
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