[发明专利]一种同步检测畜禽肉中152种化学污染物的高分辨质谱方法

摘要

本发明提供了一种同步检测畜禽肉中152种化学污染物的高分辨质谱方法，包括一个建立化学污染物标准品质谱谱库的步骤，一个样品检测的步骤，一个筛查分析的步骤。本发明覆盖磺胺类、喹诺酮类、喹噁啉类、硝基咪唑类、β‑内酰胺类、四环素类、大环内酯类、氯霉素类、苯并咪唑类、烟碱激动剂类、β‑受体激动剂和激素等152种目标化合物。本发明的方法样品前处理方法简便，通过一针进样可以筛查确证152种化合物，检测通量大，准确度高，适用于畜禽肉中多种类兽药残留的同时定性确证检测。

主权项

1.一种同步检测畜禽肉中152种化学污染物的高分辨质谱方法，其特征在于包括如下步骤：/n1)建立化学污染物标准品质谱谱库：所述的化学污染物为17α-醋酸羟基孕酮、甲基睾酮、2-氨基氟苯咪唑、3-甲基喹噁啉-2-羟酸、4-差向四环素、5-羟基甲苯咪唑、阿苯达唑砜、阿苯达唑亚砜、阿苯达唑、氨苄青霉素或氨苄西林、巴氯芬、班布特罗、丁酚胺、倍他米松、勃地酮或勃地龙、溴布特罗、康苯咪唑、卡巴氧、卡布特罗、头孢噻呋、氯霉素、醋酸氯地孕酮、金霉素、环丙苯唑、西马特罗、西布特罗、西诺沙星、环丙沙星、克伦特罗、克仑塞罗、异克仑潘特、甲基克伦特罗或克伦潘特、克仑普罗、克林霉素、可乐定、氯丙那林、氯唑西林、可的松、赛庚啶、达诺沙星或甲磺酸达氟沙星、地塞米松、双氟沙星或盐酸二氟沙星、二甲硝咪唑/地美硝唑、羟基地美硝唑、多巴酚丁胺、多西环素/强力霉素、依诺沙星、恩诺沙星、表睾酮、非班太尔、硫苯咪唑、非诺特罗、氟罗沙星、氟苯尼考、氟苯咪唑、羟基氟苯达唑、氟甲喹、氟甲睾酮、福莫特罗、羟甲基克伦特罗、羟基异丙硝唑、异丙(去甲)肾上腺素、盐酸苯氧丙酚胺、吉他霉素、左旋咪唑、左炔诺孕酮、林可霉素、拉苯咪唑、洛美沙星、鲁苯哒唑、马布特罗、马喷特罗、麻保沙星、甲苯咪唑、氨基甲苯咪唑、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、醋酸美仑孕酮、乙酰甲喹、甲氢睾酮、去氢甲睾酮、美他环素、甲基强的松龙、甲硝唑、羟基甲硝唑、萘夫西林、萘啶酸、诺龙、丙酸诺龙、乙诺酮、炔诺酮、氟哌酸/诺氟沙星、炔诺孕酮、氧氟沙星、奥西那林、苯唑西林、硫氧苯唑、噁喹酸、土霉素、丁苯咪唑、培氟沙星、喷布特罗、苯乙醇胺、吡布特罗、泼尼松龙、孕酮、喹烯酮、莱克多巴胺、利托君、洛硝哒唑、罗红霉素、沙丁胺醇、沙美特罗、沙拉沙星、康力龙、磺胺苯甲酰、磺胺氯哒、磺胺嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、氨苯磺胺、磺胺甲氧吡嗪、磺胺甲基嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲噁唑(磺胺甲基异恶唑)、磺胺甲氧哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲唑或磺胺二甲恶唑或磺胺噁唑、磺胺苯吡唑、磺胺吡啶、磺胺喹噁啉、磺胺噻唑、磺胺二甲基异嘧啶或磺胺异嘧啶、磺胺异噁唑或磺胺二甲异恶唑、特布他林、睾酮、丙酸睾酮、四环素、茶碱、噻苯咪唑、5-羟基噻苯咪唑、甲砜霉素、泰妙菌素、替米考星、群勃龙、三氯苯唑、甲氧苄啶、妥布特罗、泰乐菌素、齐帕特罗；/n将上述化学污染物对照品配制成1mg/mL的标准储备液，再取适量标准储备液用质量百分比浓度为10％的乙腈分别稀释为100ng/mL的标准工作液，采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱仪器在正负离子切换模式下检测；/n液相色谱条件：/na)色谱柱：100mm×3.0mm，粒径1.8μm的ZORBAX SB-C₁₈；/nb)柱温：30℃；/nc)进样量：10μL；/nd)流速：0.3mL/min；/ne)流动相：A：质量百分比浓度为0.1％的甲酸水溶液；B:质量百分比浓度为的0.1％的甲酸-乙腈溶液，梯度洗脱如下描述：/n 时间(min) A：0.1％甲酸水溶液％ B：0.1％甲酸-乙腈溶液％ 0 95 5 15 5 95 18 5 95 20 95 5 23 95 5 /n质谱条件：/na)电离模式：电喷雾离子源；/nb)扫描方式：正、负离子切换扫描；/nc)检测方式：全扫描/数据依赖二级扫描；/nd)脱溶剂气、锥孔气和碰撞气均为纯度在99％以上的氮气；/ne)毛细管电压：3.2kV(ESI⁺)3.0kV(ESI^-)；/nf)离子传输管温度：325℃；/ng)脱溶剂温度：350℃；/nh)鞘气：40arb；/ni)辅助气：10arb；/nj)一级全扫描范围：m/z100～1000；/nk)碰撞能量20、40、60eV；/n分别得到上述化学污染物标准品溶液的质谱图，以此建立化学污染物标准品质谱谱库；/n2)样品检测：称取样品5.00g于50mL离心管中，加入质量百分比浓度为90％的乙腈提取溶液20mL，超声提取5min，8000g离心5min，取上清液，备用；/n取备用液2mL直接过反相固相萃取柱，并收集流出液，取流出液1.6mL于40℃氮气吹干至0.5mL，用质量百分比浓度为0.1％的甲酸水溶液定容至1mL，涡旋，14000r/min离心5min，取上清液采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱仪器在正负离子切换模式下检测；检测条件如步骤1)；/n3)筛查分析：通过保留时间及精确质量数测定值来进行筛查，如检出的色谱峰保留时间与化学污染物标准品质谱谱库中的保留时间偏差在±0.2min或±5％，且母离子精确分子量与理论质量数的偏差小于10ppm，子离子确分子量与理论质量数的偏差小于20ppm，则认为检材中可能含有上述的某种化学污染物。/n