[发明专利]一种微量碎片化核酸甲基化检测的接头、引物、试剂盒及其应用有效
| 申请号： | 201910740621.6 | 申请日： | 2019-08-12 |
| 公开（公告）号： | CN110452958B | 公开（公告）日： | 2023-08-25 |
| 发明（设计）人： | 唐琼;陆利;徐根明;潘艺;赵谦 | 申请（专利权）人： | 湖南大地同年生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C12Q1/6858;C12N15/11;C40B50/06;C12Q1/6886 |
| 代理公司： | 深圳智趣知识产权代理事务所(普通合伙) 44486 | 代理人： | 邵萌 |
| 地址： | 410205 湖南省长沙*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种微量碎片化核酸甲基化检测的接头、引物、试剂盒及其应用，接头与碎片化DNA序列连接，由两条链组成，一条是长链M‑ADT‑L，一条是部分互补的短链M‑ADT‑S；引物由一条内侧特异性引物和一条外侧特异性引物的嵌套式单侧特异性引物组成。本发明还提供了利用上述接头和引物构建碎片化DNA甲基化测序文库的方法，在尿液上清cfDNA膀胱癌基因甲基化检测中，本发明的单侧特异性引物组的比对到目标区序列比例明显高于单引物靶向捕获(即U:87.2％75.1％，D:83.1％72.5％)，且适用于领域内的大多数测序平台，可以检测几乎全部的临床样本，具有较高的特异性、灵敏度和稳定性，有效解决了临床上针对不同测序平台及不同样本获得的目标基因的甲基化检测所面临的难题。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 微量 碎片 核酸 甲基化 检测 接头 引物 试剂盒 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种用于低起始量碎片化核酸甲基化检测的接头，所述接头与碎片化DNA序列连接，由两条链组成，一条是长链，称作M-ADT-L，一条是部分互补的短链，称作M-ADT-S；所述M-ADT-L和/或所述M-ADT-S序列中进行特定的修饰；所述M-ADT-L包括通用引物结合区、随机序列区、接头互补区；所述的随机序列区由6～12随机碱基组成，所述随机碱基为A、T、G、C四种中任一种。/n
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