[发明专利]一种猪旋毛虫病上转发光诊断试剂盒有效
| 申请号： | 201910742899.7 | 申请日： | 2019-08-12 |
| 公开（公告）号： | CN110514843B | 公开（公告）日： | 2021-08-10 |
| 发明（设计）人： | 刘明远;王学林;刘晓雷;唐斌;丁静;王洋;白雪;杨勇;王楠 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/531 |
| 代理公司： | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 | 代理人： | 魏征骥 |
| 地址： | 130012 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种猪旋毛虫病上转发光诊断试剂盒，属于生物领域。包括颗粒硅化及其羧基修饰，旋毛虫重组WM5制备，试剂盒的制备，在检测带T固定旋毛虫表达抗原RTWM5，在质控带C固定兔抗山羊IgG，将UCP‑NPs‑山羊抗猪IgG用结合物稀释液浇于结合垫，并烘干。优点是：该检测灵敏特异、操作简便、耗时短，为基层猪旋毛虫病的现场检测提供了参考，解决了目前胶体金试纸条因人为判读所造成的不确定性及误差的难题，实现屠宰生猪重要人兽共患旋毛虫病的活体检验，降低屠宰过程中胴体检验的压力及漏检率。 | ||
| 搜索关键词： | 种猪 旋毛虫 转发 诊断 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.一种猪旋毛虫病上转发光诊断试剂盒，其特征在于，包括下列步骤：/n(一)、颗粒硅化及其羧基修饰；/n(二)、旋毛虫重组WM5(RTWM5)制备；/n(三)试剂盒的制备，包括：/n样品垫：玻璃纤维素膜，厚度0.70mm；/n结合垫：玻璃纤维素膜，厚度0.25mm；/n分析膜：硝酸纤维素膜，平均孔径5μm；/n吸水垫：纤维素膜，厚度1.10mm；/n粘性底衬：附有压力敏感胶的聚氯乙烯板，厚度0.25mm；/n检测试纸条组装塑料外壳；/n猪旋毛虫病上转发光检测检测带和质控带喷膜浓度：/n在检测带T固定旋毛虫表达抗原RTWM5，在质控带C固定兔抗山羊IgG，将硅化及其羧基修饰的UCP-NPs颗粒，用常规标记缓冲液重悬至浓度为1mg/mL，用结合物稀释液稀释至0.5mg/mL，加入山羊抗猪IgG，持续搅拌1h；加入BSA，反应10min；4℃12000rpm离心30min，弃上清，即为UCP-NPs-山羊抗猪IgG，用结合物稀释液将离心备用的结合物重悬至终浓度0.5mg/mL，将其浇于1.0×12.5cm的结合垫，并烘干；其中：/nRTWM5用量12mg，使用浓度2mg/ml；/n山羊抗猪IgG用量10mg，使用浓度50μg/ml；/n兔抗山羊IgG用量5mg，使用浓度0.5mg/ml；/nUCP-NPs用量100mg，使用浓度0.33mg/ml。/n
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