[发明专利]一种溶菌酶的高效生产方法

摘要

本发明公开的属于溶菌酶技术领域，具体为一种溶菌酶的高效生产方法，该溶菌酶的高效生产方法步骤如下：步骤一：原料处理：将鸡蛋利用蛋清分离器分离出蛋清，然后将蛋清搅拌5分钟，使鸡蛋清的粘稠度均匀，接着利用筒筛过滤除去脐带块等其他杂质；步骤二：吸附：利用搅拌装置边搅拌蛋清边加入724树脂，使724树脂全部悬浮于蛋清中，温度控制在0‑5摄氏度，搅拌吸附3‑6小时，将蛋清在0‑5摄氏度环境中静置过夜；步骤三：去杂蛋白：将步骤二处理后的蛋清，把上层清液渐渐倒出，下层树脂用清水洗去吸附的蛋白质，反复清洗3‑5次，将树脂抽滤掉水分；该发明提高了溶菌酶的纯度，简化了生产过程，提高了生产效率的综合效果。

主权项

1.一种溶菌酶的高效生产方法，其特征在于：该溶菌酶的高效生产方法步骤如下：步骤一：原料处理：将鸡蛋利用蛋清分离器分离出蛋清，然后将蛋清搅拌5分钟，使鸡蛋清的粘稠度均匀，接着利用筒筛过滤除去脐带块等其他杂质；步骤二：吸附：利用搅拌装置边搅拌蛋清边加入724树脂，使724树脂全部悬浮于蛋清中，温度控制在0‑5摄氏度，搅拌吸附3‑6小时，将蛋清在0‑5摄氏度环境中静置过夜；步骤三：去杂蛋白：将步骤二处理后的蛋清，把上层清液渐渐倒出，下层树脂用清水洗去吸附的蛋白质，反复清洗3‑5次，将树脂抽滤掉水分；步骤四：洗脱：取磷酸缓冲液分三次加入树脂中，搅拌时间为15‑20分钟，每次搅拌后减压抽滤掉水分，然后利用硫酸铵分四次洗脱溶菌酶，每次搅拌30‑45分钟，过滤抽干，合并洗脱液，按总体积加入32％固体硫酸铵使含量达到40％，有白色沉淀产生，冷却放置过夜，弃上清，沉淀离心分离，得到粗制品；步骤五：透析：将粗制品溶解与蒸馏水中，装入透析袋，温度控制在0‑5摄氏度，透析20‑40小时；步骤六：盐析：向步骤五中的透析液中慢慢滴加1mol/L氢氧化钠，同时不断搅拌，直至PH值上升到8.5‑9时，有白色沉淀，立即离心除去，在搅拌中加入3mol/L盐酸，使溶液pH值达到3.5，按体积缓缓加入5％固体氯化钠，即有白色沉淀析出，在0‑5摄氏度环境中放置48小时，离心得溶菌酶沉淀；步骤七：干燥：将步骤六中的沉淀加入10倍量的无水丙酮，不断搅拌，然后冷处静置数小时，用漏斗过滤去丙酮，将沉淀置于真空干燥箱干燥，即可制得溶解酶。