[发明专利]一种样品中铵态氮、硝酸态氮、亚硝酸态氮以及总溶解态氮的测定方法

摘要

本发明提供了一种样品中铵态氮、硝酸态氮、亚硝酸态氮以及总溶解态氮的测定方法，属于氮含量测定技术领域。本发明在测定铵态氮时，采用了新的氧化剂(次氯酸钠和氯代异氰尿酸钠)和显色剂(水杨酸)体系，将铵态氮在氧化剂的作用下氧化为单氯胺，形成的单氯胺与显色剂形成靛酚，通过测定660nm处的紫外吸光度进行测量；在进行硝酸态氮、亚硝酸态氮和总溶解态氮测量时采用新的第一Griess试剂(N‑(1‑萘基)乙二胺二盐酸盐)和第二Griess试剂体系(磺胺和氯化钒)，进行测量，检出限低、灵敏度高。上述显色反应速度稳定、均一，能够在96孔板上进行。

主权项

1.一种样品中铵态氮、硝酸态氮、亚硝酸态氮以及总溶解态氮的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：标准曲线的建立：所述标准曲线包括铵态氮浓度‑吸光度标准曲线、硝酸态氮浓度‑吸光度标准曲线、亚硝酸态氮浓度‑吸光度标准曲线和总溶解态氮浓度‑吸光度标准曲线；所述铵态氮浓度‑吸光度标准曲线的建立包括以下步骤：配制铵态氮标准溶液，将所述铵态氮标准溶液、氧化剂和显色剂混合、显色，测定660nm处的吸光度，得到铵态氮浓度‑吸光度标准曲线；所述氧化剂为次氯酸钠和氯代异氰尿酸钠的水溶液，所述显色剂为水杨酸的氢氧化钠水溶液；所述硝酸态氮浓度‑吸光度标准曲线的建立包括以下步骤：配制硝酸态氮标准溶液，将所述硝酸态氮标准溶液、硝酸盐还原酶、第一Griess试剂和第二Griess试剂混合、显色，测定540nm处的吸光度，得到硝酸态氮浓度‑吸光度标准曲线；所述第一Griess试剂为N‑(1‑萘基)乙二胺二盐酸盐水溶液，所述第二Griess试剂为磺胺和氯化钒的盐酸水溶液；所述亚硝酸态氮浓度‑吸光度标准曲线的建立包括以下步骤：配制亚硝酸态氮标准溶液，将所述亚硝酸态氮标准溶液、第一Griess试剂和第二Griess试剂混合、显色，测定540nm处的吸光度，得到亚硝酸态氮浓度‑吸光度标准曲线；所述总溶解态氮浓度‑吸光度标准曲线的建立包括以下步骤：配制总溶解态氮标准溶液，将所述总溶解态氮标准溶液、过硫酸盐氧化剂和水混合，得到消解液；将所述消解液、硝酸盐还原酶、第一Griess试剂和第二Griess试剂混合、显色，测定540nm处的吸光度，得到总溶解态氮浓度‑吸光度标准曲线；待测样品中铵态氮、硝酸态氮、亚硝酸态氮以及总溶解态氮的测定：将所述待测样品配制成待测样品溶液，将所述待测样品溶液按照各标准曲线建立时的显色反应进行显色，得到相应氮形态的吸光度，根据相应的标准曲线，获得标准曲线测铵态氮含量、标准曲线测硝酸态氮含量、标准曲线测亚硝酸态氮含量和标准曲线测总溶解态氮含量；所述标准曲线测铵态氮含量、所述标准曲线测亚硝酸态氮含量和所述标准曲线测总溶解态氮含量分别为待测样品中铵态氮含量、亚硝酸态氮含量和总溶解态氮含量；所述标准曲线测硝酸态氮含量与所述标准曲线测亚硝酸态氮含量的差值为待测样品中硝酸态氮含量。