[发明专利]一种富含核黄素的发酵型豆浆的生产方法在审
| 申请号： | 201910813169.1 | 申请日： | 2019-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN110463769A | 公开（公告）日： | 2019-11-19 |
| 发明（设计）人： | 甘人友;葛颖颖;张家荣;高海德 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | A23C11/10 | 分类号： | A23C11/10;C12N1/20;C12N1/02;C12N15/01;C12R1/25 |
| 代理公司： | 31220 上海旭诚知识产权代理有限公司 | 代理人： | 郑立<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种富含核黄素的发酵型豆浆的生产方法，涉及食品加工技术领域，其步骤包括，步骤1：从商业泡菜汁中筛选野生型高产核黄素乳酸菌；步骤2：筛选出核黄素最高产突变菌株；步骤3：熟豆浆的制备、接种发酵。通过本发明制作的发酵豆浆，其核黄素含量可达约3.0mg/L，该产品既可满足人体大豆优质蛋白的获取，又可同时达到补充核黄素的目的，可作为一种新型健康发酵饮品。 | ||
| 搜索关键词： | 核黄素 乳酸菌 食品加工技术领域 筛选 发酵豆浆 发酵饮品 接种发酵 突变菌株 优质蛋白 发酵型 泡菜汁 熟豆浆 野生型 豆浆 富含 制备 大豆 补充 制作 健康 生产 | ||
【主权项】：
1.一种富含核黄素的发酵型豆浆的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：/n步骤1：从商业泡菜汁中筛选野生型高产核黄素乳酸菌/n1.1泡菜汁梯度稀释后分别接种到核黄素分析型固体培养基上进行培养，随后，从所述核黄素分析型固体培养基上获得的菌落中挑选出完整、光滑、颗粒较大且长势最好的90个核黄素生产乳酸菌单菌落，并将所述90个核黄素生产乳酸菌单菌落分别接种到核黄素分析型液体培养基上，并多次培养；/n1.2对步骤1.1得到的经多次培养的所述90个核黄素生产乳酸菌单菌落产核黄素的含量进行HPLC测定，根据HPLC所测得的核黄素含量，筛选出核黄素生产能力最强的一株野生菌，鉴定并命名为植物乳杆菌RYG-YYG-9049，配制成保存液进行保存；/n步骤2：筛选出核黄素最高产突变菌株/n2.1称取一定量玫瑰黄色素溶解于二甲基亚砜(DMSO)中得到玫瑰黄色素DMSO溶液，并将所述玫瑰黄色素DMSO溶液以1.0mL/管分装于1.5mL的离心管中，避光保存待用；/n2.2将4.0mL避光保存的所述玫瑰黄色素DMSO溶液加入200mL核黄素分析型培养基溶液中，混合均匀后制作平板培养基，即为含有100mg/L玫瑰黄色素的核黄素分析型固体培养基；/n2.3在不加入琼脂的前提下，按照步骤2.2的方法，依次制作浓度为10mg/L、50mg/L以及200mg/L的玫瑰黄色素核黄素分析型液体培养基；/n2.4取100μL所述植物乳杆菌RYG-YYG-9049的保存液加入到1.9mL的核黄素分析型液体培养基中，于37℃恒温厌氧罐中活化培养12小时得到菌株活化培养液，随后，取100μL上述第一次培养后的所述菌株活化培养液按上述方法重复活化2次得到最终菌株活化培养液；/n2.5取步骤2.4得到的所述最终菌株活化培养液100μL，接种到所述含有100mg/L玫瑰黄色素的核黄素分析型固体培养基中，于37℃下恒温培养2-4天；/n2.6从接种有所述最终菌株活化培养液的所述100mg/L玫瑰黄色素的核黄素分析型固体培养基上获得的菌落中挑选10个完整、光滑、颗粒较大且长势最好的突变菌株单菌落，并挑取每个所述突变菌株单菌落分别接种至2.0mL含有10mg/L玫瑰黄色素的核黄素分析型液体培养基中，于37℃下培养24小时；/n在所述含有10mg/L玫瑰黄色素的核黄素分析型液体培养基中取10个所述突变菌培养液各100μL，分别加入到1.9mL所述含有50mg/L玫瑰黄色素的的核黄素分析型液体培养基中，于37℃下培养24小时；/n在所述含有50mg/L玫瑰黄色素的的核黄素分析型液体培养基中取10个所述突变菌培养液各100μL，分别加入到1.9mL所述含有100mg/L玫瑰黄色素的的核黄素分析型液体培养基中，于37℃下培养24小时；/n在所述含有100mg/L玫瑰黄色素的的核黄素分析型液体培养基中取10个所述突变菌培养液各100μL，分别加入到1.9mL所述含有200mg/L玫瑰黄色素的的核黄素分析型液体培养基中，于37℃下培养24小时；/n2.7在所述含有200mg/L玫瑰黄色素的的核黄素分析型液体培养基中取10个所述突变菌培养液各100μL分别接种到MRS固体培养基上进行培养，将每个MRS固体培养基上获得的所述突变菌单菌落分别接种于2.0mL核黄素分析型液体培养基中进行培养，并测定其相对应的核黄素含量；/n2.8根据HPLC的核黄素含量测定结果发现，所述植物乳杆菌RYG-YYG-9049的10号突变菌，命名为植物乳杆菌RYG-YYG-9049-M10，其核黄素生产能力最强，大约为其原始野生菌株的2倍，将所述植物乳杆菌RYG-YYG-9049-M10配制成保存液进行保存；/n步骤3：熟豆浆的制备、接种发酵/n3.1挑选颗粒完整、饱满、有光泽、无霉变的大豆，用纯净水清洗三次，并在室温下于纯净水中浸泡，浸泡后将所述大豆沥干，于豆浆机中进行研磨得到生豆浆，所述生豆浆经筛子去除豆渣，过滤后的所述生豆浆于4℃下静置2小时后，在100℃下加热30分钟，得到熟豆浆，随后于室温下自然冷却；/n3.2将步骤2.8得到的所述植物乳杆菌RYG-YYG-9049-M10接种于MRS液体培养基中，于37℃下进行恒温活化培养，待接种后的所述MRS液体培养液于600nm下的吸光度值达到0.2时，于室温下10000rpm离心30秒，将上清液倒掉，回收得到的所述植物乳杆菌RYG-YYG-9049-M10，用生理盐水冲洗三次，随后重新悬浮于生理盐水中，并用生理盐水稀释至OD600为0.2，得到活化的所述植物乳杆菌RYG-YYG-9049-M10；/n3.3将活化的所述植物乳杆菌RYG-YYG-9049-M10接种至所述熟豆浆中进行发酵，接种后的豆浆于37℃下进行发酵，发酵时间为20小时，即可得到富含核黄素的发酵型豆浆。/n
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海交通大学，未经上海交通大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910813169.1/，转载请声明来源钻瓜专利网。
