[发明专利]基于tRNA-gRNA-cRNA进行日本青鳉胚胎和细胞的基因编辑系统在审
申请号: | 201910815115.9 | 申请日: | 2019-08-30 |
公开(公告)号: | CN112442512A | 公开(公告)日: | 2021-03-05 |
发明(设计)人: | 陈天圣;潘启华;蒋月雯 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/90 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 龚莹莹 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明属于分子生物学领域,利用水稻的tRNA序列构建了tRNA‑gRNA系统,该系统在青鳉胚胎和细胞中能在RNA聚合酶启动子CMV的作用下产生具有功能性的gRNA,而不需要在体外先转录gRNA,从而与CRISPR/Cas9系统共同作用对青鳉基因组进行基因编辑。该方法证明了CMV‑tRNA‑gRNA序列在鱼类细胞和胚胎内能产生有作用的gRNA并和Cas9一起进行基因编辑,同时设计了cRNA‑tRNA的策略为多基因靶位能够一步从该策略的模板进行克隆提供了便利,为多基因靶位的同步克隆和敲除提供方案,也为构建稳定的基因敲除细胞系和特定组织敲除的品系提供了一种更便捷的途径。 | ||
搜索关键词: | 基于 trna grna crna 进行 日本 胚胎 细胞 基因 编辑 系统 | ||
【主权项】:
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