[发明专利]一种基于AIE荧光探针检测细菌抗药性的方法有效
申请号: | 201910817211.7 | 申请日: | 2019-08-30 |
公开(公告)号: | CN110632044B | 公开(公告)日: | 2021-12-21 |
发明(设计)人: | 付文金;邓任堂;赖丽莎;谢岭平;张露 | 申请(专利权)人: | 东莞市厚街医院 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 东莞市华南专利商标事务所有限公司 44215 | 代理人: | 李慧 |
地址: | 523000 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及微量检测技术领域,具体涉及一种基于AIE荧光探针检测细菌抗药性的方法。包括如下步骤:将待测菌株用生理盐水配置至麦氏浊度为0.5的菌悬液;吸取6PD‑DPAN荧光探针和上述菌悬液稀释至MOPS缓冲液中,制得混合液;向无菌96孔板中的每个孔均加入上述的混合液,向除第一孔外的每个孔中均加入不同浓度的抗菌药物溶液,制得若干个待测样,检测并记录初始荧光强度值;将上述带有待测样的无菌96孔板进行孵育,每孵育一段时间,检测并记录待测样的荧光强度值。本发明的检测方法简单,易于实现,利用6PD‑DPAN荧光探针的聚集诱导发光特性和高光稳定性,可实时监测6PD‑DPAN荧光探针与菌株结合的动力学过程。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 aie 荧光 探针 检测 细菌 抗药性 方法 | ||
【主权项】:
1.一种基于AIE荧光探针检测细菌抗药性的方法,其特征在于:包括如下步骤:/n步骤(1):将待测菌株用生理盐水配置至麦氏浊度为0.5的菌悬液;/n步骤(2):吸取1mL的6PD-DPAN荧光探针和10μL步骤(1)的菌悬液稀释至10mL的MOPS缓冲液中,摇匀,制得混合液;/n步骤(3):向一次性无菌96孔板中的每个孔均加入50μL步骤(2)制得的混合液,然后再向一次性无菌96孔板中的第一孔中加入50μL的MOPS缓冲液,制得对照样,并向除第一孔外的其余每个孔中均加入50μL不同浓度的抗菌药物溶液,制得若干个待测样,利用透明膜封板,检测并记录6PD-DPAN荧光探针与混合液中菌株结合后的初始荧光强度值;/n步骤(4):将上述带有待测样的一次性无菌96孔板置于恒温35℃的孵育设备中孵育,每孵育15min,则将一次性无菌96孔板从孵育设备中取出并置于荧光检测设备中,检测并记录待测样的荧光强度值。/n
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