[发明专利]一种基于电化学和光电化学的双比率适配体传感器的制备方法及应用

摘要

本发明属于生物传感检测技术领域，涉及一种基于电化学和光电化学的双比率适配体传感器的制备方法及应用。具体为首次提出一种基于电化学和光电化学两种方法的新型双比率适配体传感器用于链霉素(STR)的特异性检测。步骤如下：步骤1、金纳米粒子(Au NPs)的制备及杂交链式反应中各核苷酸链碱基的设计；步骤2、基于电化学和光电化学双比率适配体传感器的构建。本发明构建的基于电化学和光电化学的双比率适配体传感器，为减小外界环境影响、链霉素的准确及宽范围检测提供有效途径。

主权项

1.一种基于电化学和光电化学的双比率适配体传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)制备金纳米粒子(Au NPs)水溶液，备用；/n(2)氧化铟锡玻璃(ITO)电极经预处理后，备用；/n(3)设计杂交链式反应中各核苷酸链的碱基：sDNA，Fc-rp-Fc，Fc-Apt，HP1和HP2；/n然后，将sDNA、Fc-rp-Fc和Fc-Apt进行混合，在一定温度下退火处理一定时间形成稳定的杂化结构Fc-Apt/Fc-rp-Fc/sDNA；/n将HP1和HP2分别在一定温度下退火处理一定时间形成稳定的发夹结构，处理后的HP1和HP2溶液等物质的量混合形成HP1和HP2发夹结构的混合溶液；/n(4)将步骤(1)制备的Au NPs水溶液修饰到步骤(2)预处理后的氧化铟锡玻璃电极表面，并在空气中干燥，此时，产品标记为Au NPs/ITO；/n(5)在一定温度下，将步骤(3)制备的Fc-Apt/Fc-rp-Fc/sDNA杂化结构在步骤(4)修饰好的电极上作用一定时间，通过金巯键的作用固定在电极表面，此时，产品标记为Fc-Apt/Fc-rp-Fc/sDNA/Au NPs/ITO；/n(6)将步骤(5)得到的产品Fc-Apt/Fc-rp-Fc/sDNA/Au NPs/ITO修饰一定量的巯基己醇(MCH)，孵育一定时间，以封闭Au NPs未结合的特异性位点；继续修饰不同浓度STR溶液，室温下孵育一定时间,之后用PBS对产品进行清洗，此时，产品标记为Fc-rp-Fc/sDNA/Au NPs/ITO；/n(7)将步骤(3)制备的HP1和HP2发夹结构的混合溶液在步骤(6)修饰好的电极上，室温下孵育一定时间，此时，得到的产品标记为HP2/HP1…/Fc-rp-Fc/sDNA/Au NPs/ITO；/n(8)将步骤(7)制得的产品HP2/HP1…/Fc-rp-Fc/sDNA/Au NPs/ITO修饰一定浓度的亚甲基蓝(MB)溶液，室温下孵育一定时间,之后用PBS对产品进行清洗，得到链霉素的电化学和光电化学双比率适配体传感器。/n