[发明专利]一种霍山石斛多糖注射液的制备方法

摘要

本发明公开一种霍山石斛多糖注射液的制备方法，先将霍山石斛提取出霍山石斛多糖，之后将霍山石斛多糖通过盐酸水解，配制成霍山石斛多糖注射液；霍山石斛多糖注射剂肌注给药可显著增加免疫抑制模型小鼠的脾脏指数和胸腺指数；与口服给药组相比，霍山石斛多糖注射剂肌注给药组小鼠的胸腺指数显著高与口服给药组。说明制备的霍山石斛多糖注射剂可以有效改善免疫抑制小鼠的免疫功能，并且治疗效果优于口服给药；解决了目前霍山石斛和其他品种石斛的使用剂型主要为粉剂、口服液、胶囊，尚未见注射剂型，霍山石斛和其他品种石斛多糖目前也没有注射剂型的技术问题。

主权项

1.一种霍山石斛多糖注射液的制备方法,其特征在于，包括如下步骤：步骤S1、(a)将霍山石斛剪成条状，粉碎成粉末，称取粉末15‑25g，加入到1L的圆底烧瓶中，加入350‑500mL的蒸馏水，放入96℃水浴锅中，搅拌并加热煎煮2h；(b)2h后，倒入离心管离心，控制离心速度为3000rpm，离心时间为4min，收集上清液和沉淀，向沉淀加入450‑500mL的蒸馏水，继续煎煮2h，2小时后以3000rpm的转速离心3min，收集上清液和沉淀，向沉淀里面加入450‑500mL的蒸馏水，煎煮2h，2h后以3000rpm的转速离心3min，收集上清液；(c)合并b中收集的上清液；(d)将合并后的上清液用旋转蒸发仪浓缩至300‑400mL，并加入sevage试剂，控制sevage试剂与合并后的上清液的体积比为1∶3，摇匀，以8000rpm离心1min，收集上清液，然后用sevage法再重复2次；(e)收集上清液，加入95％的乙醇1.5‑2L，沉淀，用4层纱布过滤，用95％的乙醇洗涤2次，之后用丙酮洗涤3次，透析，用旋转蒸发仪在真空度‑0.06‑0.08MPa、80℃的条件下浓缩至相对密度为1.10‑1.30的浓缩液，之后真空冷冻干燥4h，制得霍山石斛多糖；步骤S2、将霍山石多糖在pH＝1的盐酸溶液中水解1h，加入氢氧化钠调节pH至中性，透析，用旋转蒸发仪真空度‑0.06‑0.08MPa、80℃的条件下浓缩至相对密度为1.10‑1.30的浓缩液，之后真空冷冻干燥4h，制得经盐酸水解后的霍山石斛多糖；步骤S3、将盐酸水解后的霍山石斛多糖，配制成浓度8‑10mg/mL，过滤、装于安瓿中，每支安瓿装10mL，121℃下加热30min，冷却、检测，制得霍山石斛多糖注射液。