[发明专利]一种利用GEM去除重组蛋白内毒素的方法在审
申请号: | 201910854618.7 | 申请日: | 2019-09-10 |
公开(公告)号: | CN110777138A | 公开(公告)日: | 2020-02-11 |
发明(设计)人: | 韩烨;赵芳坤;肖华志;周志江 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N9/82 | 分类号: | C12N9/82 |
代理公司: | 12201 天津市北洋有限责任专利代理事务所 | 代理人: | 琪琛 |
地址: | 300350 天津市津南区海*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了一种利用GEM去除重组蛋白内毒素的方法,它涉及一种去除大肠杆菌表达重组蛋白中内毒素的方法,蛋白‑AcmA融合蛋白重组表达载体,诱导表达后利用GEM(革兰氏阳性基质)进行纯化固定化,然后利用Triton X‑114处理固定化蛋白以去除内毒素。该方法可以在低温(4℃)下进行内毒素的去除工作,避免温度改变影响蛋白活性,并简化去除内毒素操作。 | ||
搜索关键词: | 内毒素 去除 重组蛋白 大肠杆菌表达 重组表达载体 革兰氏阳性 固定化蛋白 融合蛋白 影响蛋白 诱导表达 固定化 基质 蛋白 | ||
【主权项】:
1.一种利用GEM去除重组蛋白内毒素的方法,其特征在于,包括以下步骤:/n1)构建L-天门冬酰胺酶-AcmA融合表达载体;/n2)利用IPTG诱导表达;/n3)制备GEM;/n4)GEM纯化固定化重组L-天门冬酰胺酶-AcmA;/n5)内毒素的去除。/n
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