[发明专利]一种从临床血液中检测肺炎链球菌病原菌的方法在审
| 申请号： | 201910861058.8 | 申请日： | 2019-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN110551833A | 公开（公告）日： | 2019-12-10 |
| 发明（设计）人： | 李敬;王旭;孙宝林;郭建;吴谨 | 申请（专利权）人： | 卓源健康科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/04;C12Q1/6806;C12N15/11;C12R1/46 |
| 代理公司： | 34120 合肥顺超知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人： | 张芳 |
| 地址： | 230088 安徽省合肥市高新区望*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种从临床血液中检测肺炎链球菌病原菌的方法，包括以下步骤：(1)血液中肺炎链球菌基因组DNA的提取；(2)PCR检测：a、利用肺炎链球菌基因组DNA序列设计一段特异性的PCR引物，正向引物如SEQ ID NO.1所示；反向引物如SEQ ID NO.2所示；引物的扩增片段长度为293bp；b、以从血液中提取的肺炎链球菌基因组DNA为模板，采用特异PCR引物进行PCR扩增；c、对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳及检测，扩增出长度为293bp的片段则判定为检测出肺炎链球菌。本发明对血液中肺炎链球菌的检测极限达到10CFU/mL，临床应用的灵敏度高。 | ||
| 搜索关键词： | 肺炎链球菌基因组 肺炎链球菌 检测 血液 病原菌 琼脂糖凝胶电泳 反向引物 扩增片段 临床血液 临床应用 正向引物 灵敏度 扩增 引物 判定 | ||
【主权项】：
1.一种从临床血液中检测肺炎链球菌病原菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)血液中肺炎链球菌基因组DNA的提取；/n(2)血液中肺炎链球菌PCR检测：/na、利用肺炎链球菌基因组DNA序列设计一段特异性的PCR引物，所述PCR引物包括正向引物和反向引物；/n所述正向引物如SEQ ID NO.1所示：5’-GCTTGGATGTTCGTGGTA-3’；/n所述反向引物如SEQ ID NO.2所示：5’-GATTTCTGGGTGCTCTGC-3’；/n引物的扩增片段长度为293bp；/nb、以步骤(1)中从血液中提取的肺炎链球菌基因组DNA为模板，采用特异性的PCR引物进行PCR扩增；/nc、对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳及检测，扩增出长度为293bp的片段则判定为检测出肺炎链球菌。/n
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