[发明专利]一种人工形成干巴菌菌塘的方法

摘要

一种人工形成干巴菌菌塘的方法，通过选取适合的林地和幼松，人工方法开掘菌塘，并在菌塘的土壤中添加高度分散的树脂微粒和干巴菌腐败提取的胺类、酰胺类物质，人工监测养护，促进干巴菌繁殖体对土壤的适应和加快形成真菌与植物共生体系的生长，形成能够使干巴菌营养体正常生长、菌丝活力旺盛的菌塘；此种方法具有操作简单、接种成活概率高、形成共生体系速度快和形成菌塘周期短的优点；利用树脂溶胶与土壤作用形成有机质和矿物质、无机盐分布的面积，提高了松树与干巴菌的信息传递速率，依靠土壤的吸附，催生更多有益于物质循环的林下微生物，增强土壤保水能力，实际加快了林地内物质和能量循环速度。

主权项

1.一种人工形成干巴菌菌塘的方法，其特征在于：包括以下具体步骤：/n1)在干巴菌生长季节提前选好适宜菌株，选择没有人畜影响，可以封闭生长至11月份的干巴菌作为种子，并做标记，自然条件下使其在菌塘内自然干燥，然后采集，研碎成粉，过20目筛，干燥冷藏；/n2)采集成熟肥厚的干巴菌子实体，去除杂草泥土，撕碎，在溶剂瓶加入撕碎干巴菌，纱布覆盖瓶口，在通风环境下，置于接种箱内，20℃-29℃保温存放10-15天，每两天加一次水，保证整体湿润，待干巴菌菌丝表层腐烂，固液分层，液体颜色由金黄色转为黑色时，往液体中加入与干巴菌质量比为1:1的质量分数50％-95％的乙醇溶液，80℃-90℃温水浴15分钟-30分钟；/n3)提取步骤2)所制得的乙醇溶液200ml-400ml过粗滤网，再用细菌膜过滤，将滤液移入玻璃缸中，往玻璃缸中加入500ml-800ml蒸馏水稀释，然后取出400ml-600ml稀释后溶液加入圆底烧瓶加热减压0.2atm-0.5atm蒸馏除去乙醇，得到胺类、酰胺类物质混合物；/n4)将松香与无水乙醇按松香质量：无水乙醇质量＝120～180：900～1000提前浸提，得到棕黄色的松香乙醇溶液，过滤去除松香乙醇溶液中的不溶性长链树脂和松针杂草后与无菌水按照1:4的体积比加入到溶剂置换釜中，采用离心喷雾法分散到无菌水中，减压0.2atm-0.5atm抽提乙醇制成质量分数15％-25％浓缩松香溶胶；/n5)按质量分数：首先将1％-5％的木糖、1％-5％的硝酸铵溶于74.5％-92.95％的无菌水中，再加入0.05％-0.5％步骤3)制得的胺类、酰胺类混合物质，然后将步骤4所制得的浓缩松香溶胶按5％-15％混入溶解，得到稀释的松香溶胶；/n6)将步骤5)制得的稀释的松香溶胶用灌装机分装于1000ml棕色玻璃瓶内，避光储存于19℃-25℃的保藏室备用；/n7)选择人工形成菌塘的地点及幼龄松树；/n8)在选好的幼松树下，以树桩为中心开设深度为4cm-15cm，宽度为1cm-3cm，长度为10cm-30cm的放射状沟槽4-6条；/n9)在11月干燥9-14天的情况下，测定土壤水分，当表层土壤水分低于15％，菌种播种土层土壤水分低于15％-25％的环境条件下，在开设好的每条沟槽内，用毛刷清理沟槽，使表层土疏松，松树幼根暴露，然后分别均匀注入1000ml-3000ml步骤6)制得的溶胶，然后将5-10g步骤1)制得的干巴菌粉均匀撒入沟槽内，以松针覆盖，不可覆盖土壤；/n10)在步骤9)完成5天后，测定槽内土壤水分及透光情况，当测得槽内土壤水分湿度低于25％-30％时，使用喷雾器增加覆盖层湿度，可增加湿度至60％-70％，通过增加覆盖松针或减少覆盖松针促使槽内保持光照强度在0-15lux；至14-16天若没有菌苔出现，适当揭开松针通风，使土壤水分保持在30％-45％；若因水分含量低于25％-30％而没有形成菌苔，即需进行干巴菌补种：在该条槽内均匀注入1000ml-3000ml步骤6)所得的溶胶，并将步骤1)所得的干巴菌菌粉5g-10g，用步骤6)所得的溶胶按水分含量10％-15％润湿后，在17℃-24℃避光培养箱内培养12小时-24小时，取出后均匀撒入沟槽内，以松针覆盖；待白色苔状干巴菌菌落在槽内形成直径2mm-7mm菌苔，则停止喷雾器增湿管理，使其上层营养体随自然气候进入休眠，形成孢子繁殖体；14-16天后，仍无干巴菌苔出现，则需再次进行干巴菌补种：再次揭开松针通风，然后在该条槽内均匀注入1000ml-3000ml步骤6)所得的溶胶，并将步骤1)所得的干巴菌菌粉5g-10g，用步骤6)所得的溶胶按水分含量10％-15％润湿后，在17℃-24℃培养箱内避光培养12小时-24小时，取出后均匀撒入沟槽内，以松针覆盖；/n11)4月松树开始生长，在距沟槽表面深度1cm-2cm厘米内开始新生松树根系，激活休眠播种干巴菌所形成的孢子，并逐渐形成稳定共生体系；于降雨后或人工喷洒水使得土壤湿度达到60％-85％，再次施加步骤6)制得的溶胶500ml-3000ml，使松树根系生长，进行自然条件下的松树根系被干巴菌菌丝侵染的过程；/n12)步骤1)至步骤11)形成的槽内第一年即可有小和散的干巴菌出现，但不会长大和形成固定生长点，第二年才会形成多个散布生长点，形成菌塘；在第三年将该沟槽扩大为直径为10-20cm塘穴，测定并保持光照强度在0.5lux-100000lux日夜光照强度变化刺激20-30天，发育形成子实体。/n