[发明专利]一种抗体和磁珠定向偶联的方法在审
申请号: | 201910865034.X | 申请日: | 2019-09-09 |
公开(公告)号: | CN110568176A | 公开(公告)日: | 2019-12-13 |
发明(设计)人: | 杨致亭;田永帅;金宇婷;隋振国;杨锋斌;葛玮 | 申请(专利权)人: | 潍坊市康华生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N33/535;G01N33/543 |
代理公司: | 37255 潍坊正信致远知识产权代理有限公司 | 代理人: | 李聚坤 |
地址: | 261023 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及生物技术检测领域,尤其涉及一种抗体和磁珠定向偶联的方法,包括(1)磁珠预处理;(2)S‑NHS处理;(3)EDC处理;(4)加入抗体。采用本发明的方法抗体和磁珠可实现定向偶联,大大提高了有效抗体的得率,进一步提高了检测实际的灵敏度和准确度。 | ||
搜索关键词: | 磁珠 抗体 偶联 预处理 准确度 检测领域 有效抗体 灵敏度 得率 生物技术 检测 | ||
【主权项】:
1.一种抗体和磁珠定向偶联的方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:/n(1)磁珠预处理:取MES缓冲液,加入磁珠母液,振荡均匀,磁分离后弃上清,再加入MES缓冲液,振荡均匀后备用;/n(2)S-NHS处理:向步骤(1)中加入用MES缓冲液配制的S-NHS溶液,振荡混匀,调节反应体系pH值为酸性;/n(3)EDC处理:向步骤(2)的反应体系中加入用MES缓冲液配制的EDC溶液,振荡混匀,调节反应体系pH值为酸性,置于恒温恒湿箱中,旋转混匀反应一段时间,磁分离后弃上清,加入MES缓冲液,振荡均匀;/n(4)加入抗体:向步骤(3)中加入抗体,将磁珠标记反应物置于恒温恒湿箱中,旋转混匀反应一段时间,磁分离后弃上清,加入TRIS缓冲液,振荡均匀,弃上清,在磁珠标记反应物中加入磁珠标记缓冲液A,混合均匀,将磁珠标记反应物置于恒温恒湿箱中,静置反应一段时间,磁分离后弃上清,再加入磁珠标记缓冲液A,振荡均匀,弃上清,加入磁珠保存液,置于4℃环境中保存备用。/n
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