[发明专利]一种肝癌动物模型的制备方法在审
| 申请号： | 201910884959.9 | 申请日： | 2019-09-19 |
| 公开（公告）号： | CN110558280A | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 王庆华;戚龙菊;董传明;吴勤峰;邵义祥;朱顺星;刘春;王旭;吴刘成;王生存 | 申请（专利权）人： | 南通大学 |
| 主分类号： | A01K67/02 | 分类号： | A01K67/02;A61K31/7008 |
| 代理公司： | 11427 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 徐思波 |
| 地址： | 226019 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种肝癌动物模型的制备方法，包括以下具体步骤：（1）选取4周龄的ICR小鼠，观察饲养2周；将HepG2细胞在加有10％胎牛血清的DMEM培养基中培养传代扩增后用注射器注射入ICR小鼠腹腔；（2）待小鼠出现明显腹水后抽出腹水2mL，加入离心管内，离心，弃上清；加入5mL PBS溶液重悬、吹洗，再离心5分钟，弃上清；（3）用PBS溶液以步骤（2）中同样的方法重复洗2‑3遍；（4）在步骤（3）中弃上清后的沉淀内加入5mL PBS溶液吹散细胞，离心3分钟；用精密移液器将上清和沉淀上层的红细胞取出，保留下层白色沉淀；本发明制备的原发性肝癌小鼠模型的效果大大优于目前已有的原发性肝癌动物模型建立方法，较已有模型具有更加真实性、实用性、方便性、经济性。 | ||
| 搜索关键词： | 原发性肝癌 腹水 制备 沉淀 红细胞 传代 动物模型建立 肝癌动物模型 胎牛血清 小鼠模型 方便性 离心管 移液器 注射器 吹散 吹洗 腹腔 扩增 小鼠 重悬 下层 精密 真实性 取出 注射 抽出 上层 饲养 细胞 重复 保留 观察 | ||
【主权项】：
1.一种肝癌动物模型的制备方法，其特征在于，包括以下具体步骤：/n选取4周龄的ICR小鼠，观察饲养2周；将HepG2细胞在加有10％胎牛血清的DMEM培养基中培养传代扩增后，PBS洗涤2~3次后，400μL PBS重悬后用注射器注射入ICR小鼠腹腔；/n待小鼠出现明显腹水后抽出腹水2mL，加入离心管内，离心，弃上清；加入5mL PBS溶液重悬、吹洗，再离心5分钟，弃上清；/n用PBS溶液以步骤（2）中同样的方法重复洗2-3遍；/n在步骤（3）中弃上清后的沉淀内加入5mL PBS溶液吹散细胞，离心3分钟；用精密移液器将上清和沉淀上层的红细胞取出，保留下层白色沉淀；/n用1mL DMEM培养基重悬细胞，计数，再加入适量DMEM培养基计数稀释成1×10
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