[发明专利]一种质粒丢失菌株的高通量筛选方法在审
| 申请号： | 201910893204.5 | 申请日： | 2019-09-20 |
| 公开（公告）号： | CN110591917A | 公开（公告）日： | 2019-12-20 |
| 发明（设计）人： | 杨艳坤;赵天宇;王鹏程;聂简琪;孙杨;刘秀霞 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/02 | 分类号： | C12N1/02;C12R1/84 |
| 代理公司： | 32227 无锡盛阳专利商标事务所(普通合伙) | 代理人： | 顾吉云;郭金玉 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种质粒丢失菌株的高通量筛选方法，其不仅操作简便，而且筛选效率高。一种质粒丢失菌株的高通量筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将含有质粒的菌株进行传代培养；（2）将传代后的菌悬液在固体平板培养基上划线，培养至长出单菌落；（3）将含筛选压力培养基和不含筛选压力培养基分别分装至多孔板中；（4）挑取单菌落并接种至含有含筛选压力培养基的多孔板的培养孔中，同时挑取同一单菌落并接种至含有不含筛选压力培养基的多孔板的相对应位置的培养孔；（5）培养结束后，在含筛选压力培养基中无法生长而在不含筛选压力培养基中可以生长的菌株即为质粒丢失菌株；筛选压力为抗生素压力、营养缺陷型压力或温度压力。 | ||
| 搜索关键词： | 培养基 筛选 菌株 单菌落 多孔板 高通量筛选 培养孔 接种 种质 固体平板培养基 传代 相对应位置 营养缺陷型 传代培养 温度压力 质粒丢失 生长 菌悬液 分装 质粒 划线 抗生素 | ||
【主权项】：
1.一种质粒丢失菌株的高通量筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：/n（1）将含有质粒的菌株进行传代培养；/n（2）将传代后的菌悬液在固体平板培养基上划线，培养至长出单菌落；/n（3）将含筛选压力培养基和不含筛选压力培养基分别分装至多孔板中；/n（4）挑取单菌落并接种至含有含筛选压力培养基的多孔板的培养孔中，同时挑取同一单菌落并接种至含有不含筛选压力培养基的多孔板的相对应位置的培养孔中；/n（5）培养结束后，在含筛选压力培养基中无法生长而在不含筛选压力培养基中可以生长的菌株即为质粒丢失菌株；/n所述筛选压力为抗生素压力、营养缺陷型压力或温度压力。/n
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