[发明专利]一种培养表达重组人表皮生长因子的工程菌的方法在审
| 申请号： | 201910897501.7 | 申请日： | 2019-09-23 |
| 公开（公告）号： | CN110564661A | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 钱永常;张旭初;宋叶华 | 申请（专利权）人： | 杭州纽龙生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P21/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 11018 北京德琦知识产权代理有限公司 | 代理人： | 潘怀仁;王珍仙 |
| 地址： | 310018 浙江省杭州市萧山区*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种培养表达重组人表皮生长因子的工程菌的方法，所述方法包括下述步骤：(1)一级种子培养，将甘油冻存的工程菌接种至包含卡那霉素的LB液体培养基中，培养，得到一级种子培养液；(2)二级种子培养，将步骤(1)中得到的所述一级种子培养液接种至包含卡那霉素的LB液体培养基中，培养，得到二级种子培养液；(3)将步骤(2)中得到的所述二级种子培养液接种至发酵罐中，培养，然后诱导，得到发酵罐上清液；和(4)从步骤(3)中得到的所述发酵罐上清液中分离和纯化重组人表皮生长因子。其中，所述一级种子培养液的OD | ||
| 搜索关键词： | 二级种子培养液 一级种子培养液 工程菌 重组人表皮生长因子 接种 卡那霉素 发酵罐 上清液 发酵 二级种子培养 一级种子培养 分离和纯化 甘油 冻存 诱导 | ||
【主权项】：
1.一种培养表达重组人表皮生长因子的工程菌的方法，所述方法包括下述步骤：/n(1)一级种子培养，将甘油冻存的工程菌接种至包含卡那霉素的LB液体培养基中，培养，得到一级种子培养液；/n(2)二级种子培养，将步骤(1)中得到的所述一级种子培养液接种至包含卡那霉素的LB液体培养基中，培养，得到二级种子培养液；/n(3)将步骤(2)中得到的所述二级种子培养液接种至发酵罐中，培养，然后加入0.1mM至0.3mM的IPTG和0.05％至0.15％的甘氨酸，得到发酵罐上清液；和/n(4)从步骤(3)中得到的所述发酵罐上清液中分离和纯化所述重组人表皮生长因子。/n
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