[发明专利]一种提高工程菌分泌表达重组人表皮生长因子的方法有效
| 申请号： | 201910915456.3 | 申请日： | 2019-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN110551199B | 公开（公告）日： | 2022-01-25 |
| 发明（设计）人： | 钱永常;张旭初;宋叶华 | 申请（专利权）人： | 杭州纽龙日尚生物制品有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/485 | 分类号： | C07K14/485;C12N15/70 |
| 代理公司： | 北京德琦知识产权代理有限公司 11018 | 代理人： | 潘怀仁;王珍仙 |
| 地址： | 310018 浙江省杭州市经济*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种提高工程菌分泌表达重组人表皮生长因子的方法。所述方法包括下述步骤：(1)将甘油冻存的工程菌接种至包含卡那霉素的LB液体培养基中，培养，得到种子培养液；(2)将所述种子培养液接种至MBL培养基中，培养，然后加入IPTG、甘氨酸、Triton X‑100，诱导，得到发酵上清液；和(3)从所述发酵上清液中分离和纯化重组人表皮生长因子。其中，诱导时，加入终浓度为0.1mM至0.3mM的IPTG；终浓度为按质量计0.2％至1.5％的甘氨酸，终浓度为按质量计0.002％至0.2％的Triton X‑100。本发明提高了hEGF的分泌量，缩短了发酵时间，从而降低了成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 工程 分泌 表达 重组 表皮 生长因子 方法 | ||
【主权项】：
1.一种提高工程菌分泌表达重组人表皮生长因子的方法，所述方法包括下述步骤：/n(1)将甘油冻存的工程菌接种至包含卡那霉素的LB液体培养基中，培养，得到种子培养液；/n(2)将所述种子培养液接种至MBL培养基中，培养，然后加入IPTG、甘氨酸和Triton X-100，诱导，得到发酵上清液；以及/n(3)从所述发酵上清液中分离和纯化所述重组人表皮生长因子。/n
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