[发明专利]一种高通量单细胞小RNA文库构建方法有效
| 申请号： | 201910921843.8 | 申请日： | 2019-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN110747514B | 公开（公告）日： | 2022-03-04 |
| 发明（设计）人： | 蔡涛;李佳 | 申请（专利权）人： | 北京生命科学研究所 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C40B40/06 |
| 代理公司： | 北京三友知识产权代理有限公司 11127 | 代理人： | 刘鑫;韩蕾 |
| 地址： | 102206 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了高通量单细胞小RNA文库构建方法。该方法为：制备单细胞悬液，将其加入到单细胞操作系统的芯片的微孔中，并选择单一活细胞的微孔进行实验；依次进行细胞裂解反应、3’端连接反应、去除游离接头反应、5’端连接反应、反转录反应和两次PCR反应；产物进行纯化和片段筛选回收，从而获得能够直接用于上机测序的单细胞小RNA文库；在进行3’端连接反应过程中，所采用的3’接头的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；在进行5’端连接反应过程中，所采用的5’接头的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明的方法具有准确度高、灵敏度高、重复性好等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 通量 单细胞 rna 文库 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种高通量单细胞小RNA文库构建方法，其包括以下步骤：/n制备单细胞悬浮液，将其加入到单细胞操作系统的芯片的微孔中，并选择单一活细胞的微孔进行实验；/n依次进行细胞裂解反应、3’端连接反应、去除游离接头反应、5’端连接反应、反转录反应和两次PCR反应；/n产物进行纯化和片段筛选回收，从而获得能够直接用于上机测序的单细胞小RNA文库；/n在进行3’端连接反应过程中，所采用的3’接头的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；/n在进行5’端连接反应过程中，所采用的5’接头的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。/n
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