[发明专利]一种诱导人iPSCs或ESCs分化为棕色脂肪细胞的方法有效
申请号: | 201910931320.1 | 申请日: | 2019-09-27 |
公开(公告)号: | CN110592004B | 公开(公告)日: | 2023-06-06 |
发明(设计)人: | 季晨博;尤梁惠;曹彦 | 申请(专利权)人: | 南京市妇幼保健院 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;A61K35/35;A61P3/04 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 王艳 |
地址: | 210004 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种iPSCs或ESCs分化为棕色脂肪细胞的方法,体外贴壁培养人iPSCs或ESCs,将消化下来的细胞进行悬浮培养以形成具有三维结构的拟胚体;添加小分子化合药物一种或多种组合诱导EB分化;消化EB形成单细胞或细胞团块,接种于包被过的培养板中;给予促棕色脂肪细胞分化因子诱导;培养数天后,给予成脂分化的培养基进行诱导。本发明建立的诱导人iPSCs或ESCs分化成脂肪细胞的方法,具有培养周期短、分化效率高、安全性高等特点。PSCs或hESCs来源的脂肪细胞经鉴定符合棕色脂肪细胞形态学及功能标志分子的基本特征,并且与成人棕色脂肪具有类似的功能,可以用于肥胖以及相关代谢疾病的治疗。 | ||
搜索关键词: | 一种 诱导 ipscs escs 化为 棕色 脂肪 细胞 方法 | ||
【主权项】:
1.一种诱导人iPSCs或ESCs分化为棕色脂肪细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:/n1)在培养基中贴壁培养人iPSCs或ESCs,维持其未分化的状态;/n2)采用消化液消化人iPSCs或ESCs进行悬浮培养,形成拟胚体;/n3)拟胚体培养数天后,更换为培养基A,并添加一种或多种小分子化合药物,诱导拟胚体分化;/n4)拟胚体诱导3~10天后,消化形成单细胞或细胞团块,接种于包被的培养板中;/n5)待细胞贴壁后,给予促棕色脂肪分化因子诱导;若细胞汇合后,可传代后继续诱导;/n6)采用成脂分化培养基进行诱导,获得功能性人棕色脂肪细胞。/n
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