[发明专利]一种检测山杨型蜂胶的方法

摘要

本发明提供一种检测山杨型蜂胶的方法，将待测蜂胶样品毛胶与乙醇混合，得到乙醇浸膏，并用无水乙醇重新复溶并稀释到合适的上样浓度，采用HPLC‑UV检测样品中的p‑香豆酸和p‑香豆酸苄酯的含量，通过对蜂胶中的p‑香豆酸和p‑香豆酸苄酯成分进行定性和定量分析，检测出山杨型蜂胶。本发明提取蜂胶的试剂便宜易得，对人体毒性小，适用于蜂胶制品的检测；不需要单独提取或者富集p‑香豆酸和p‑香豆酸苄酯，能够准确的区分出山杨型蜂胶。本发明提供的检测方法能够有效、快捷、稳定的区分出山杨型蜂胶，对于了解杨树型蜂胶，加强蜂胶的质量控制以及开发与利用山杨型蜂胶都有重要意义。

主权项

1.一种检测山杨型蜂胶的方法，其特征在于，通过以下步骤实现：/n(1)标准液制备：取p-香豆酸和p-香豆酸苄酯，配置成浓度为2mg/ml的工作母液，分别进一步稀释成150μg/mL，120μg/mL，90μg/mL，60μg/mL，30μg/mL和400μg/mL，200μg/mL，100μg/mL，50μg/mL，25μg/mL；/n(2)待测样品溶液制备：待测蜂胶毛胶-20℃冰箱保存，检测前取出并粉碎，以料液比1:10～1:15与70～90％乙醇溶液混合，超声提取半小时并过滤，滤渣加入70～90％乙醇溶液继续超声提取，重复三次，合并过滤后的滤液，-20℃冰箱冷冻后5000r离心除杂，真空旋转蒸发浓缩，并置于烘箱内烘干，得到蜂胶乙醇提取物，配置成10mg/mL的蜂胶乙醇溶液，有机微孔滤膜过滤后，得到待测样品溶液；/n(3)山杨型蜂胶检测：取上述的标准液和样品溶液，行液相色谱法，流动相是1％的乙酸水溶液和甲醇，进样量为5μL，紫外的检测波长为280nm，流速为1mL/min进行梯度洗脱，获得不同浓度标准液与待测样品溶液的色谱图，计算色谱图中p-香豆酸和p-香豆酸苄酯对应的峰面积和对应标准品的标准曲线，得到待测样品溶液中p-香豆酸和p-香豆酸苄酯的含量，区分待测样品溶液中山杨型蜂胶。/n