[发明专利]一种胞内外分泌4-α-糖基转移酶的基因工程菌及其发酵方法和应用在审
| 申请号： | 201910938663.0 | 申请日： | 2019-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN110684703A | 公开（公告）日： | 2020-01-14 |
| 发明（设计）人： | 黄静;欧阳小英;万惠惠;施瑞;杨婷;朱锐 | 申请（专利权）人： | 华东师范大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/54;C12N15/70;C12N9/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 31257 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 董红曼 |
| 地址： | 200062 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种胞内外分泌4‑α‑糖基转移酶(4GT)的基因工程菌(重组大肠杆菌)，属于酶基因工程和酶工程领域。所述基因工程菌通过将来源于嗜热栖热菌HB8的编码4GT的基因通过质粒pET‑32a(+)导入到宿主细胞大肠杆菌中得到。本发明构建的基因工程菌株的胞外4GT酶活可达到167.47U/mL。该重组酶的最适温度为60℃，最适pH为7.0，所述4GT具有转苷活性，能使淀粉中支链淀粉的侧链长度延长，适合食品、化妆品和医药等工业应用的需要，能用于高支化淀粉的工业生产。本发明的优点在于以大肠杆菌为宿主，4GT不仅在其胞内进行了表达，而且在其胞外也能高效表达，这不仅减少了杂蛋白对4GT酶活及4GT纯化时的干扰，也可简化生产4GT的流程。 | ||
| 搜索关键词： | 大肠杆菌 基因工程菌 酶活 淀粉 宿主 基因工程菌株 重组大肠杆菌 嗜热栖热菌 糖基转移酶 长度延长 高效表达 工业应用 基因工程 简化生产 宿主细胞 支链淀粉 质粒pET 高支化 酶工程 杂蛋白 重组酶 最适pH 侧链 构建 转苷 分泌 化妆品 基因 | ||
【主权项】：
1.一种胞内外分泌4-α-糖基转移酶的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌通过将来源于嗜热栖热菌HB8的编码4GT的基因通过质粒pET-32a(+)导入大肠杆菌中得到；所述基因工程菌的胞内与胞外均能分泌4GT。/n
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