[发明专利]一种提高寇氏隐甲藻DHA产率和得率的方法在审
| 申请号： | 201910951387.1 | 申请日： | 2019-10-08 |
| 公开（公告）号： | CN110628758A | 公开（公告）日： | 2019-12-31 |
| 发明（设计）人： | 张卫文;吕明明;王方忠;陈磊 | 申请（专利权）人： | 昆明藻能生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N13/00 | 分类号： | C12N13/00;C12P7/64;G01N21/33;G01N1/30;C12R1/89 |
| 代理公司： | 53115 昆明今威专利商标代理有限公司 | 代理人： | 赛晓刚 |
| 地址： | 650108 云南省昆明市五华区科发路139号*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公布了一种通过ARTP诱变获得高DHA产率和得率的寇氏隐甲藻ATCC30556突变藻种的方法。其特征是包含如下步骤：(1)对寇氏隐甲藻ATCC30556进行ARTP诱变，获得诱变藻种后，利用淀粉能够和碘相结合呈现紫色的原理，对转化子进行通量筛选，挑选平板上与出发株相比，菌落直径较大并且菌体呈现淡紫色的菌落；(2)利用摇瓶发酵，复筛上述(1)中获得的候选诱变藻种，获得生长速率、油脂和DHA产率都显著性提高，同时淀粉含量显著降低的藻种；(3)对(2)中获得的诱变藻种利用5‑L发酵罐进行表型进一步确认，确定其DHA产率及得率。利用本发明的方法获得的寇氏隐甲藻突变藻种与出发藻种相比，DHA产率和得率分别提高到原来的1.69倍和1.28倍，达到57.7mg/L/h和51.96mg/g，相比于其他的育种方法，本发明获得的DHA产率和得率是目前报道的最高值，在DHA产业化领域具有重要的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 藻种 产率 诱变 得率 寇氏隐甲藻 菌落 淀粉 突变 摇瓶发酵 产业化 淡紫色 发酵罐 显著性 转化子 表型 复筛 菌体 通量 紫色 育种 筛选 生长 应用 | ||
【主权项】：
1.一种提高寇氏隐甲藻DHA产率和得率的方法，其特征在于：通过减少藻体内部淀粉含量，提高流向生长和DHA的碳代谢流，获得高生长和高DHA含量的藻种，具体操作包括：/n(1)利用ARTP技术诱变及碘蒸平板法初步筛选直径较大、菌落颜色较淡的寇氏隐甲藻诱变藻种；/n(2)采用摇瓶发酵，复筛获得的诱变藻种，确定最终诱变藻种；/n(3)采用5-L发酵罐对最终诱变藻种的表型进一步确认，确定其DHA产率及得率。/n
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