[发明专利]新型高稳定性碱性蛋白酶突变体的筛选在审
| 申请号： | 201910951895.X | 申请日： | 2019-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN111334494A | 公开（公告）日： | 2020-06-26 |
| 发明（设计）人： | 路福平;王洪彬;邱悦悦;王玉迎;李雪;刘逸寒 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N9/54 | 分类号： | C12N9/54;C12N15/57;C12N15/75;C12N15/10;C12R1/125 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 300457 天津市*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明属于酶的基因工程技术领域，涉及新型的高稳定性碱性蛋白酶突变体的筛选。本发明通过易错PCR技术筛选获得了克劳氏芽孢杆菌来源碱性蛋白酶的高稳定性突变体。这些突变体基因经测序发现分别在第747‑749位为GAT，第859‑861位为GTT，第955‑957位为CTG，相应的氨基酸序列突变分别是在第165位突变为Asp，第203位为Val和第235位为Leu。发酵48h后，突变体发酵液的酶活力分别为30U/mL、41U/mL和35U/mL，比野生型碱性蛋白酶aprE重组菌株表达的发酵液的酶活力分别提高了11％、51％和30％。将得到的发酵液进行超滤纯化后在40℃恒温孵育48h后，碱性蛋白酶突变体的酶活保留率比野生型碱性蛋白酶的酶活提高了30％、88％、42％。这些高稳定性碱性蛋白酶突变体的筛选，有助于改善碱性蛋白酶的储存和应用效果。 | ||
| 搜索关键词： | 新型 稳定性 碱性 蛋白酶 突变体 筛选 | ||
【主权项】：
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